《游加工过程概论》PPT课件

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1、13下游加工过程概论生物工程系吴蕾本课程主要内容13生物下游加工过程概论14发酵液的预处理和固液分离方法15细胞破碎16沉淀法17膜分离技术18溶剂萃取法19双水相萃取20吸附法21离子交换法22液相色谱法23亲和分离技术24结晶法25基因工程药物生产实例主要参考书《新编生物工艺学》，俞俊棠主编，化工出版社，2003《生物分离工程》（第二版），孙彦编著，化工出版社，2005《生物工程下游技术》（第二版），刘国诠主编，化工出版社，2003《生化分离工程》严希康编著，化工业出版社《生物分离原理与技术》欧阳平凯编著，化

2、工业出版社成绩平时成绩占30%，包括平时作业、课堂(提问,点名)等。期末考试占70%，闭卷考试方法总成绩:平时(30%)+期末(70%)。13.1下游加工过程在生物技术中的地位下游加工过程是生物工程的一个重要组成部分.发酵液、动植物细胞培养液、酶反应液和动植物组织细胞与体液等中提取、分离纯化、富集生物产品的过程称为下游加工过程(downstreamprocessing)它由一些化学工程的单元操作组成,但由于生物物质的特性，有其特殊要求，而且其中某些单元操作在一般化学工业中应用较少。在发酵产品的生产中，分离和精制过

3、程所需的费用占成本的很大部分。对传统发酵工业(如抗生素、乙醇、柠檬酸)，分离和精制部分占整个工厂投资费用的60％，对重组DNA生产蛋白质、精制的费用可占整个生产费用的80％一90％。从第一个基因工程药物，人胰岛素在1982年投产后，人们逐渐认识到下游加工过程的落后有可能会阻碍生物技术的发展，特别是当有其他生产方法与其相竞争时。英国政府工业部，于1983年发起生物分离计划(BIOSEP)，专门研究下游加工过程，有7个国家、50家公司参加。1987年英国化学工业会召开了专门讨论下游加工过程的国际会议。美国United

4、EngineeringFoundation从1981年开始连续召开了生物产品回收的会议。我国也于1989年在济南召开了一次专门会议。人们逐渐取得了共识；现代生物技术的发展是和下游技术的进步紧密相关的。13.2传统生化产品和基因工程产品回收方法的比较1.生化产品的类型按用途分类食品类。保健品类。医用类产品（1998年，719种）。抗生素112种农业用产品（1998年，36种）。生物试剂类（1998年，975种）。按分子量大小分类Mass<1000D：抗生素、有机酸、、多肽类等Mass>1000D：酶、抗原、抗体、多

5、肽、蛋白质类按发酵时目的产物所在的位置分类cell内：胰岛素、白细胞介素、干扰素、重组蛋白质cell外：抗生素（青霉素、红霉素）、胞外酶（α-淀粉酶）等2.传统生化产品和基因工程产品在提取和精制上的差异传统生化产品都为小分子(工业用酶除外，但它们对纯度要求不高、提取方法较简单)．其理化性能(如平衡关系等)数据都为已知，因此放大比较有根据；基因工程产品大多为大分子，必要数据缺乏，放大多凭经验。由于第一代基因工程产品都以E.coli作为宿主，表达产品处于胞内，提取前需将细胞破碎，细胞内物质释放出来，给提取增加了很

6、多困难；而发酵液中的产物，浓度较低，杂质又多，且一般大分子较小分子不稳定(易失活，如对剪切力)，故提取较困难。大分子(蛋白质)的分离主要困难在于杂蛋白的分离，由于蛋白质都内氨基酸所构成，所以性质相似，分离主要依靠高分辨力的精制方法，如色谱分离等。3.分离效率的评价浓缩率（富积率，concentrationfactor）原料(Rawmaterial)分离器产品(Product)FW,VW,cT,W,cX,W废液(Wastefluid)意义：1）如mT>1，则目标产物得到富积；2）如mT=mX，则目标产物未得到分离

7、纯化。分离因子(separativefactor)，或分离系数(separativecoefficient)意义：A、目标产物浓度，杂质浓度，则分离因子大，分离效率；B、=1时，则未分离。故在分离为主要目的时,回收率(recovery)：纯化因子(purificationfactor)对于具有生物活性的蛋白质或酶，常常用分离前后目标产物的比活A[inU/mg]之比表示目标产物的分离纯化程度，13.3生化产品及加工过程的特点1)应用面广。医药卫生、环保、动植物生长调节、食品和试剂等2)种类繁多。分子量

8、X0–X000000，结构功能复杂，生物活性各异。3)目的产物在初始物料中的含量低。青霉素（4.2%）、庆大霉素（0.2%）、干扰素（<50ug/ml）。4)产品价格与产物浓度呈反比原料中目标产物浓度越低，所需能耗越高，分离过程成本越大。5)初始物料成分复杂,常需多个步骤,产品总收率低。除少量产物外，还有大量的细胞及碎片、其他代谢物（几百上千种）、培养基成分、无机盐等。6