烟草黑胫病菌、青枯病菌拮抗放线菌的筛选及控病研究

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1、西南大学硕士学位论文烟草黑胫病菌、青枯病菌拮抗放线菌的筛选及控病研究姓名：王岩申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：肖崇刚;易龙20090501孺婴烟草黑胫病菌、青枯病菌拮抗放线菌的筛选及控病研究植物病理学专业硕士研究生王岩指导教师肖崇刚教授易龙副教授摘要烟草是我国重要的经济作物之一，近几年来，重庆烟区以烟草黑胫病、青枯病发病最为严重，造成大量经济损失。在烟草病害的多种防治方法中，生物防治对烟叶生产的可持续发展具有较好的应用前景。放线菌是生防微生物的重要来源，在植物病害的生物防治中占有重要地位。本试验从采自我国几大烟区的烟草根

2、围土壤中分离筛选出对烟草黑胫病、青枯病病原菌有拮抗效果的放线菌，进行温室控病研究及菌株的鉴定，并进一步探讨其生防控病机理。具体结果如下：1、从重庆、贵州、云南、河南、陕西、山东这几个我国主要的烟草生产地区共采集烟草根围土壤样品57份。在高氏一号培养基上采用平板稀释法分离获得415株放线菌。2、将分离获得的415株放线菌分别采用平板对峙法和平板喷雾法对烟草黑胫病菌、烟草青枯病菌进行初筛，得到有拮抗活性的菌株178株，占分离总数的42．9％。其中对烟草黑胫病菌有拮抗活性的菌株134株，占分离总数的32．3％。对烟草青枯病菌有拮抗活性的菌

3、株77株，占分离总数的18．6％。而对两种病害均有拮抗作用的活性菌株为33株，占分离总数的7．95％。3、对初筛拮抗半径在10mm以上的烟草黑胫病菌拮抗菌以及初筛拮抗半径在5mm以上的烟草青枯病菌拮抗放线菌菌株进行复筛，测定单个菌株的平板抑菌效果。对烟草黑胫病菌抑菌带宽在15,-～35mm拮抗菌共有11株菌株，其中菌株HLL3．4、BX2-5．4抑菌带宽平均值为33．3mm和32mm；对烟草青枯病菌的抑菌圈直径在35"-'55mm的活性菌株有7株，菌株GAS1-9和YYD3．32抑菌圈直径均在50mm以上。4、温室盆栽试验结果显示，

4、参试拮抗菌株发酵原液对两种病害均有良好的防治效果。对烟草黑胫病的防治效果在38．13％"-'-88．89％；相对防效50％以上的菌株8株，占总数的61．5％；防效在80％以上的菌株2株，菌株BX2．5．4的防治效果最好，西南大学硕十学位论文达88．89％；其次为BXl．1，防效为88．13％。拮抗菌对烟草青枯病的防治效果在37．89％'--'90．06％；防效在60％以上的菌株有6个，占总数的85．7％。相对防效最高的菌株为SXL1-7，防效90．06％；其次为菌株GASl．9，相对防效为85．72％。5、通过形态和培养特征的观察、

5、生理生化的测定对平板抑菌和温室控病筛选出的13株拮抗菌进行分类鉴定，初步认为13株拮抗菌均为放线菌，其中链霉菌属(Streptromyces)6株，包括白孢类群、绿色类群、黄色类群和粉红孢类群弗氏亚群；链轮丝菌属(Streptroverticillium)3株；糖单孢菌属(Saccharomonospora)1株；鞘孢囊菌属(Elytrosporangium)1株；孢囊放线菌属(Actinosporangium)1株。另外对5株温室防效较好的菌株更深入的进行了16SrDNA序列及系统发育分析，结合其形态学及生理生化特性，确定菌株的分

6、类地位。结果表明：菌株GASl．9为娄彻氏链霉菌(Streptromycesrochei)；BXl．1为变异链霉菌(Streptromycesvariabilis)；BX2．5．4为吸水链霉菌(Streptromyceshygroscopicus)；SYZ2．6为放线细菌(Actinomycetalesbacterium)；SXLl．7与皱褶链霉菌(Streptromycesplicatus)最相近。6、对5株温室防效较好的菌株进行拮抗代谢产物分析，结果表明，参试菌株都具有良好的生防潜力。其中SYZ2．6并IBXl．1均能产生几丁质

7、酶、纤维素酶、蛋白酶以及嗜铁素等生防活性物质。关键词：放线菌烟草黑胫病菌烟草青枯病菌拮抗ⅡAbstractScreeningandbiocontroleffectofantagonisticactinomycetesagainstparasiticaandRalstoniasolannacearumCandidate：WangYanAdvisor：Prof．XiaoChong—gangAssco．Prof．YiLongTobaccoblackshankcausedbyPhytophthoraparasitica,tobaccobac

8、terialwiltcausedbyRalstoniasolannacearum，aretheimportantdiseaseswithseriouslossinthetobaccoareaofChongqing．Biocontrol