环氧合酶-2在胃癌中的表达及与血转移和预后的关系

《环氧合酶-2在胃癌中的表达及与血转移和预后的关系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、浙江大学硕士学位论文环氧合酶—2在胃癌中的表达及与血转移和预后的关系姓名：秦琪申请学位级别：硕士专业：外科学（普外）指导教师：于吉人2003.3.25浙江大学硕士学位论文一中文摘要环氧合酶一2在胃癌中的高表达及与血转移和预后的关系浙江大学医学院2000级硕士研究生导师外科学(普外)秦琪于吉人中文摘要．，f许多报道显示人类的多种恶性肿瘤，如胃癌、结肠癌、乳腺癌、＼肺癌等，能比它们的正常组织合成更多的前列腺素(PA)。环氧合酶(COX)是花生四烯酸(从)转化成前列腺素代谢中的限速酶，可分为在许多正常组织恒定表达的原生性COX—l和在炎症组织中表达增强的诱生性COX一2

2、Ⅲ。最近，多项研究表明COX-2的过表达与多种恶性肿瘤的发生发展有关。80年代以来，西方数项大型流行病学调查发现，长期使用非甾体类抗炎药(NASAID)治疗的类风湿关节炎患者，其结肠癌等各种恶性肿瘤的发生率明显下降。1。NASAID抑制肿瘤的机制在于抑制、一它的靶分子COX一2“1／本研究通过检测COX一2的表达与胃癌各项临床，病理特征及预后之间的关系，旨在探讨COX一2在胃癌发生和转移中的作用。f／材料与方法＼一、研究对象1．RT—PCR检测标本来源：我院2001．11--2002．10手术切除，经病浙江大学硕士学位论文一中文摘要理证实的47例胃癌标本，及相对应

3、的阴性切缘。2．免疫组化标本来源：我院1984—1993年手术切除，经病理证实的195例胃癌标本。并且根据临床和病理资料，对于癌肿的组织学类型，肿瘤淋巴管侵犯，静脉侵犯，肝转移，淋巴结转移，腹膜转移等各项资料进行分析。二、RT—PCR检测：I．引物序列：B—actin上游引物为：5’．TCGTGATGGACTCCGGTGAC．3’，下游引物为：5·一TcGTGGATGCCACAGGACTC．3’。COX-2上游引物为：5‘一TGAAACCCACTCCAAACACAG．3’下游引物为：5'-TCATCAGGCACAGGAGGAAG．3’。2．实验方法：将100rag

4、冻存组织在液氮中碾磨成粉末，加入lrnlTRIzol试剂提取组织总RNA。取RNA2ug用于逆转录，PCR反应条件为：94度预变性4min，然后32个循环的扩增，最后72度延伸10min．每个循环包括94度变性45s，57度退火45s，72度延伸60s。PCR产物经1．5％琼脂糖电泳，通过凝胶成像系统读取目的电泳条带的密度扫描值，将COX．2条带与B—actin条带的比值作为COX．2的表达相对量。三、免疫组化检测l免疫组化法检测COX．2在胃癌中的表达：采用ENVISl0N(两步法)，COX．2单克隆抗体(抗体稀释比l：200)37℃60mira加入HRP标记的

5、羊抗鼠IgG(Envision二抗)，37"C孵育60min；DAB显色。2浙江大学硕士学位论文一中文摘要2免疫组化阳性结果判定标准：阳性细胞为呈棕色的阳性反应产物。阳性细胞数小于10％为组织表达阴性，大于10％为阳性。四、统计学方法RT-PCR检测结果的数据以平均数±标准差表示(：--+s)表示，均数间比较用Veflcoxon检验。使用例联表分析临床病理资料与免疫组化的结果，z2检验差异的显著性；用Kaplan·Meier法分析患者生存率，不同组别间的生存率差别用时序检验(togranktest)。血转移的多种危险因素用多分类反应变量的Logistic回归分析。

6、P<0．05定为统计学差异有显著性。结果1．COX一2mRNA在胃癌及相应切缘非癌组织中的表达47例胃癌组织中均有不同密度的COX-2条带出现，胃癌组织中COX-2mRNA的表达明显高于正常组织(p<0．001)。浸润深度为pTl一T2胃癌组织的表达量为0．75±O．43，浸润深度为T3．T4胃癌组织的表达量为1．14±0．67，两者之间的差别有显著性(p=O．01)。2．COX．2免疫组化阳性与胃癌组织临床病理特征的关系COX一2蛋白在胃癌癌细胞胞浆和核膜部位染色阳性，胃癌组织深层浸润的癌细胞常出现COX一2蛋白染色强阳性。分化型胃癌COX．2的表达率显著高于未

7、分化型胃癌的表达率。浸润深度为pT2，pT3及pT4的胃癌COX-2的表达率，三者之间的差别无显著性(p=O．483)。伴淋巴管侵犯的胃癌COX一2的表达率与无淋巴管侵犯的胃癌COX一2的表达3浙江大学硕士学位论文一中文摘要率两者的差异无显著性(p=O．63)。伴静脉侵犯的胃癌COX．2的表达率与无静脉侵犯的胃癌COX一2的表达率两者的差异显著(p=O．03)。伴淋巴结转移的胃癌COX．2的表达率明显高于淋巴结转移阴性的胃癌COX．2的表达率(p=o．002)。伴肝脏转移的胃癌COX．2的表达率明显高于肝脏转移阴性的胃癌COX．2的表达率(p=O．017)。发生血

8、转移的胃癌