组织中的糖、脂、蛋白质

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1、三、生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测的原理[连一连]糖类的检测蛋白质的检测脂肪的检测1.实验步骤50%酒精的作用——洗掉浮色现配现用2.实验注意问题注:非还原糖(如蔗糖)+斐林试剂现象:(1)还原糖鉴定实验浅蓝色Cu(OH)2的颜色1.还原性糖与非还原性糖:还原性糖:非还原性糖:有还原性基团——游离醛基或酮基的糖;如:葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、纤维二糖。淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。斐林试剂(现配现用)还原性糖(醛基)+斐林试剂→砖红色沉淀3.反应原理:还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O2.鉴定还原糖的试剂:为什么不用植物的叶或西

2、瓜与西红柿的果实??由于叶片中叶绿素的颜色较深,西瓜与西红柿的果实颜色为红色,对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用,导致实验现象不明显,因此,也不宜作实验材料。2.实验注意问题(1)还原糖鉴定实验①浅色浅:不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料,防止颜色的干扰。②还原糖含量高:不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)4.材料的要求:(2)鉴定淀粉的方法:碘—碘化钾溶液(蓝色)(3)脂肪的鉴定1.方法:染色时间脂肪滴颜色橘黄色红色2~3分钟1分钟苏丹III苏丹IV3.鉴定脂肪的实验材料最好选择富含脂肪的种子,如花生种子(取其子叶)。2.实验注意问题P182种方法2.试

3、剂3.在下列四支试管中分别加入一些物质。甲试管:豆浆;乙试管:人体必需的8种氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和蒸馏水。上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是()A.甲、丁B.甲、乙、丁C.甲、乙、丙D.甲、丙、丁D(4)蛋白质(三肽、多肽)的鉴定2.实验注意问题实验材料:最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官),植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋清注:蛋清作材料,必须稀释。预留部分组织样液做对比二苯胺试剂(蓝色)(5)DNA的鉴定P26混合染色剂:甲基绿使DNA分子显绿色。吡啰红使RNA分子显红色。试剂:4.用碘液、

4、苏丹Ⅲ染液和双缩脲试剂测得甲、乙、丙三种植物的干种子中三大类有机物的颜色反应如下表,其中“+”的数量代表颜色反应深浅程度,下列有关说法不正确的是()种子试剂碘液苏丹Ⅲ染液双缩脲试剂甲+++++++乙++++++++丙+++++++A.乙种子中主要含蛋白质B.碘液、苏丹Ⅲ染液和双缩脲试剂与相应的物质发生的颜色反应分别是蓝色、橘黄色和紫色C.在观察颜色时有可能用到光学显微镜D.这三种试剂的使用均不需要水浴加热A鉴定物质实验试剂实验现象注意事项淀粉斐林试剂砖红色沉淀试剂现用现配、沸水浴加热苏丹III、IVIII橘黄色IV红色可用显微镜观察双缩脲试剂紫色先加NaOH,

5、后加CuSO4二苯胺蓝色沸水浴加热碘液蓝色操作(见下)P102黑暗处理→对照处理(如遮光)→酒精脱色→清水冲洗→碘液检验还原糖、脂肪、蛋白质、DNA的鉴定还原性糖脂肪蛋白质DNA不同点比较项目斐林试剂双缩脲试剂使用方法实质反应条件反应原理颜色浓度乙液CuSO4浓度为0.05g/mLB液CuSO4浓度为0.01g/mL相同都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH浓度都是0.1g/mL甲液和乙液混合均匀后即可使用,且现配现用使用时先加A液再加B液新配制的Cu(OH)2反应碱性条件下的Cu2+需水浴加热不需加热即可反应还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,C

6、u(OH)2被还原为Cu2O具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物砖红色紫色5.根据“检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质”实验,回答下列问题:(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原糖所用的试剂是___,该试剂与细胞内的还原糖发生作用,形成___沉淀。(2)在鉴定花生子叶中脂肪的实验中,能将脂肪染成橘黄色的染液是_____,用其染色时,冲洗浮色要用体积分数为50%的酒精,这是因为体积分数为50%的酒精能_______。斐林试剂砖红色苏丹Ⅲ染液溶解苏丹Ⅲ染液(3)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时,向组织样液中加入双缩脲试剂A摇匀,再向样液中加入双缩脲试

7、剂B摇匀。其中双缩脲试剂B的量只有3~4滴,而不能过量,为什么?_____________________________________________。过量的双缩脲试剂B会与双缩脲试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖了生成的紫色5.根据“检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质”实验,回答下列问题:(4)本实验的注意事项:①斐林试剂极不稳定,其甲液和乙液需_____,使用时再临时混合均匀用于实验。②双缩脲试剂的使用,应先加__________________,造成碱性环境,再加_________________。③在还原糖的鉴定中,对试管中的溶液水浴加热时,试管底

8、部不要触及________;试管口不要

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