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1、学校代号10731学号092077905016分类号R284密级硕士学位论文截短侧耳素高产菌株重离子诱变及高通量筛选学位申请人姓名赵晓彬培养单位生命科学与工程学院导师姓名及职称梁剑平研究员学科专业微生物与生化药学研究方向生物技术制药论文提交日期2012年5月学校代号:10731学号:092077905016密级:兰州理工大学硕士学位论文截短侧耳素高产菌株重离子诱变及高通量筛选学位申请人姓名:赵晓彬导师姓名及职称:梁剑平研究员培养单位:生命科学与工程学院专业名称:微生物与生化药学论文提交日期:2012年5月20日论文答辩日期:2012年6月2日答辩委员会主席:李唯TheStudyof
2、HeavyIonBeamBreedingandHigh-throughputScreeningofPleuromutilin-high-productionStrainsbyZHAOXiaobinB.E.(HuazhongAgriculturalUniversity)2008AthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScienceinPharmaceuticalScienceintheGraduateSchoolofLanzhouUniversityofTechnology
3、SupervisorResearcherLiangJianping兰州理工大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权兰州理工大学可以将本学位论文的
4、全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1、保密□,在______年解密后适用本授权书。√2、不保密□。(请在以上相应方框内打“√”)作者签名:日期:年月日导师签名:日期:年月硕士学位论文目录摘要IAbstractIII第1章绪论11.1工业微生物制药技术概述11.1.1菌种的获得11.1.2高产菌株的选育21.1.3菌种保藏技术21.1.4发酵工艺条件的确定31.1.5发酵产物的分离提取31.2截短侧耳素国内外研究现状41.2.1截短侧耳素简介41.2.2截短侧耳素的结构与活性41.2.3截短侧耳素产生菌及其选育
5、61.2.4截短侧耳素的发酵71.2.5截短侧耳素的提取81.3重离子辐照微生物育种91.3.1重离子加速器与重离子束概述91.3.2重离子辐照在微生物育种中的应用111.4微生物发酵过程优化与响应面法实验设计121.5高通量技术与微生物筛选141.5.1高通量技术概述141.5.2高通量技术在微生物育种中的应用151.6本研究的主要内容与意义17第2章重离子辐照诱变截短侧耳素产生菌182.1材料与方法182.1.1菌种182.1.2仪器182.1.3培养基与培养方法182.1.3辐照样品的处理192.1.4辐照方法及剂量的选择192.1.5菌种的保藏192.1.6辐照诱变后致死率
6、和致死剂量的确定192.1.7截短侧耳素含量测定方法192.2结果与分析202.2.1贯穿辐照截短侧耳素产生菌的致死率202.2.2注入辐照截短侧耳素产生菌的致死率与致死剂量212.2.3注入辐照后存活菌株的正突变率212.2.4注入辐照诱变高产菌株的筛选222.3讨论23第3章截短侧耳素产生菌发酵条件的响应面法优化243.1材料与方法243.1.1菌种24硕士学位论文3.1.2培养基配方243.1.3仪器243.1.4产量分析方法243.2结果与分析253.2.1主要影响因素的确定253.2.2最佳发酵培养基的确定273.2.3优化培养基的验证293.3讨论29第4章截短侧耳素高
7、产菌高通量筛选方法的建立304.1材料与方法304.1.1菌种与培养304.1.2试剂与仪器304.1.3高效液相色谱法测定发酵液中截短侧耳素的含量314.1.4特征波长的确定314.1.5高通量测定方法标准曲线的绘制324.1.6常规发酵方法中发酵产物的提取与截短侧耳素含量的测定324.1.7高通量固体发酵方法中发酵产物的提取与截短侧耳素含量的测定324.1.8统计分析方法324.2结果与分析324.2.1高效液相色谱法中截短侧耳素标准曲线的绘制结果324.2.2C
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