草鱼转录因子runx1和runx3的分离鉴定及其免疫功能研究

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1、Ａ去种後矣聲ＵＮＩＶ巨ＲＳＩＴＹＯＦＥＬＴＲＯＮＩＣＳＣ巨ＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＩＮ巨ＣＨＮＯＬＯＧＹＯＦＣＨＡ博±学位论文ＤＯＣＴＯＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮＩ论文题国草鱼转录因子Ｒｕｎｘｌ和Ｒｕｎｘ３的分离握定ａＭＢ及其免疫功能妍究学科专业生物医学工程学号２００９１１０９０１１０作者姓名姚富丽指导教师周红毅授１｜Ｉ独剑性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文

2、中特别加臥标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得电子科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表＾〇＾谢意。作者签名；觀震娜日期；么？巧年ｔ月义７日论文使用授权本学位论文作者完全了解电子科技大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权电子科技大学可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索

3、，可抖采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论义在解密后应遵守此规定）作者签名：論、堯雨导师签名：Ｃ（＼日期：巧年（月互日７分类号密级注1UDC学位论文草鱼转录因子Runx1和Runx3的分离鉴定及其免疫功能研究（题名和副题名）姚富丽（作者姓名）指导教师周红教授电子科技大学成都（姓名、职称、单位名称）申请学位级别博士学科专业生物医学工程提交论文日期2015.04论文答辩日期2015.06学位授予单位和日期电子科技大学2015年06月27日答辩委员会主席评阅人注1：注明《国际十进分

4、类法UDC》的类号。MOLECULARIDENTIFICATIONANDIMMUNOFUNCTIONALCHARACTERIZATIONOFTRANSCRIPTIONFACTORRUNX1ANDRUNX3INGRASSCARPADoctorDissertationSubmittedtoUniversityofElectronicScienceandTechnologyofChinaMajor:BiomedicalEngineeringAuthor:YaoFuliAdvisor:Prof.ZhouHongSchool:Scho

5、olofLifeSciengceandTechnology摘要摘要Runt相关转录因子（Runt-relatedtranscriptionfactor，Runx）是一个转录因子家族。哺乳动物Runx家族包含3个成员：Runxl、Runx2和Runx3，它们在多种生理活动中发挥了重要调节作用。其中Runx1和Runx3在免疫系统中的功能更令人关注，主要参与调节免疫细胞的增殖、分化和功能等。目前，虽然斑马鱼和河鲀的Runx家族成员及其辅助因子CBFβ已被克隆和鉴定，但是Runx1和Runx3在鱼类的免疫学功能还未知。本论文以草鱼

6、为研究模型，首先鉴定了Runx1、Runx3及CBFβ的分子特征，然后提供它们参与免疫反应的证据，最后阐明它们的免疫调节功能，特别是在介导转化生长因子β（Transforminggrowthfactor-β，TGF-β)调节作用中的地位。研究内容如下：1.草鱼Runx1和Runx3的分离鉴定和诱导表达分析：（1）通过简并PCR和RACEPCR等多次PCR反应，克隆获得草鱼Runx1五种剪接体（Runx1v1-5）和Runx3的cDNA序列。结构特征分析、氨基酸多序列比对及系统进化树分析证明它们分别是哺乳动物的Runx1和Ru

7、nx3的同源基因。（2）Runx1的五种剪接体中，Runx1v1-3具有完整的功能结构域，包括转录活化结构域（transactivationdomain，TAD)、抑制结构域（inhibitorydomain，ID)、PY模体及C末端VWRPY模体，而Runx1v4-5缺乏TAD、ID、PY及VWRPY等功能结构域。组织分布检测发现Runx1v1-3和Runx1v4-5具有相似的组织分布特征，在胸腺中表达水平最高，其次是脾、肾、头肾等组织，在外周血白细胞中表达较高；Runx3在胸腺和脾中表达水平最高，其次是外周血白细胞。（3

8、）LPS和PHA均能刺激草鱼外周血白细胞Runx1v1-3、Runx1v4-5和Runx3基因表达上调，而polyI:C只对Runx1v1-3和Runx3有诱导作用。（4）嗜水气单胞杆菌感染促使草鱼Runx1v1-3和Runx3在头肾、脾及胸腺组织中的表达不同程度增强，而Runx1v4-5