泥鳅养殖水体中芽孢杆菌的筛选、生长特性及其应用效果研究

《泥鳅养殖水体中芽孢杆菌的筛选、生长特性及其应用效果研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、论文题目泥鳅养殖水体中芽孢杆菌的筛选、生长特性及其应用效果研究研究生姓名何沅滨指导教师姓名李义专业名称水产养殖研究方向水产动物疾病论文提交曰期2015年4月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名:苏州大

2、学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在____年_月解密后适用本规定。非涉

3、密论文1^/论文作者签名：^>^'/K日期：tl泥鳅养殖水体中芽孢杆菌的筛选、生长特性及其应用效果研究中文摘要中文摘要氨氮、亚硝态氮的积累和有机物污染是泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus)池塘养殖水体恶化，病害频发及品质下降的主要原因。利用水中有益微生物对已污染的养殖水环境进行生物修复是目前研究与开发的热点，而通过筛选获得净水效果和制剂生产性能优良的优势菌株是研发高效微生态制剂的关键。目前水产养殖用益生菌制剂很多，但针对泥鳅使用的益生菌的筛选、生长特性及应用研究则未见报道。本研究从泥鳅养

4、殖池塘水中分离筛选出1株益生枯草芽孢杆菌(NQ1)，考察了NQ1的生长特性、培养特性、安全性、水质净化效果以及对泥鳅免疫功能影响，试验结果可为在泥鳅养殖中推广应用提供依据。研究获得的具体结果如下：1．泥鳅养殖水体中益生芽孢杆菌的筛选从泥鳅养殖池塘水样中分离纯化得到4株芽孢杆菌，经过降解氨氮、亚硝态氮能力筛选试验，获得1株优势目的菌株，命名为NQ1。在模拟淡水中，在氨氮、亚硝态氮初始浓度分别为5mg/L和2mg/L时，2d后菌株NQ1对氨氮的降解率为33.5%，对亚硝态氮的降解率为99.2%。根据形态学特征和生

5、理生化特性结果，将其初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。经生长特性研究表明，枯草芽孢杆菌NQ1可在培养6h后进入对数生长期，在培养16h后即达到稳定生长阶段；同时对温度、盐度、pH都具有较好的适应性。安全性试验证实，试验浓度(最高为1×107cfu/mL)的枯草芽孢杆菌NQ1对泥鳅安全。此外，将1×107cfu/mL的NQ1与1×107cfu/mL的嗜水气单胞菌混合添加至养殖水体中，以空白组为阴性对照组，以添加1×107cfu/mL嗜水气单胞菌的试验组为阳性对照组，暂养泥鳅14d，结果

6、显示，NQ1与嗜水气单胞菌混合添加组的泥鳅存活率较阳性对照组高25%。2．枯草芽孢杆菌NQ1的生长特性及培养基的优化以普通牛肉膏蛋白胨培养基作为初始培养基，研究了不同培养时间、初始pH值、温度、盐度(NaCl浓度)、转速、装液量和接种量对芽孢杆菌NQ1生长的影响，结果表明：菌株NQ1最大活菌数的培养条件为发酵时间20h，初始pH7.4，温度为28℃，盐度为0.5%(w/v)，转速为180r/min，装液量为80mL/250mL，接种量为10%。采用单因子试验和L4)正交试验优化了种子培养基的组成，结果表明，9

7、(3I中文摘要泥鳅养殖水体中芽孢杆菌的筛选、生长特性及其应用效果研究实验条件下的最佳种子培养基为：蛋白胨为(2%)(w/v)、葡萄糖为(2%)(w/v)、NaCl为(0.3%)(w/v)，三种成份对NQ1菌株产活菌数影响力大小顺序为蛋白胨、NaCl、葡萄糖。以上述最佳种子培养基培养，NQ1菌株产活菌数达10.44×108cfu/mL。3．枯草芽孢杆菌NQ1对泥鳅养殖水质的影响以0、1×105、1×106和1×107cfu/mL的浓度将枯草芽孢杆菌NQ1添加至养殖水体中，考察NQ1对泥鳅水质指标的影响。结果表明

8、，NQ1使用14d后，1×107cfu/mL浓度组的氨氮降解率(52.67%)、亚硝态氮降解率(50.18%)和硫化物降解率(48%)均为3个试验组中的最高值，而且pH波动最小(7.76～7.65)。由此表明，1×107cfu/mL的枯草芽孢杆菌NQ1对净化泥鳅养殖池塘水质具有明显的作用。4．枯草芽孢杆菌NQ1对泥鳅消化酶活性及非特异性免疫的影响以0(对照)、1×105(低浓度)、1×106(中低浓