共胁迫下玉米幼苗microrna文库的分析与验证

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1、犬ｉｔ技－大學ＤＡＬＩＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕士芽位记文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ共胁迫下玉米幼苗ｍｉｃｒｏＲＮＡ文库的分析与验证到■去／生物化学与分子生物学、学１１作者姓名指导教师苏乔副教授２０１５年６月答辩日期＿＿＿硕士学位论文ｍｉｃｒｏＲＮ共胁迫下玉米幼苗Ａ文库的分析与验证ＴｈｅｍｉｃｒｏＲＮＡＬｉｂｒａｒｉｅｓＡｎａｌｙｓｉｓａｎｄＶｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＭａｉｚｅ－ＳｅｅｄｌｉｎｇｓＵｎｄｅｒＣｏｓｔｒｅｓｓ作者姓名：

2、学科、专业：生物化学与分子生物学学号：２１２１８０８３指导教师：苏乔副教授完成日期：２０１５年５月大ｓｉ理工大摩ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中巳经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果一。与我同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承

3、担相关法律责任。学位论文题目：哀ｍｉ胁細飞五集械滿作者签名日期：年」Ｌ月＿±＿日大连理工大学硕士学位论文摘要干旱、盐和碱等非生物胁迫对植物的生长、发育和产量影响很大。玉米一一是，种重要的作物，目前对于玉米非生物胁迫的研究集中在单胁迫多个胁迫共处理ｃｏＲＮＡ一的情况很少。ｍｉｒｉｎｉＲＮＡ是种广泛存在于植物中的非编码小ＲＮＡ，在非生物（）胁迫中扮演着重要的角色。对于干旱、盐和碱共胁迫下玉米幼苗ｍｉＲＮＡ的研宄目前还没有报道。因此，本研宄构建２个ｍｉＲＮＡ文库，蹄选得到对干旱、盐和碱共胁迫有显一ｍ著响应的ｍｉＲＮＡ，通过进步分析和验证

4、，了解这些ｉＲＮＡ的功能。对ｍｉＲＮＡ文库的数据进行分析，共得到３１个ｍｉＲＮＡ家族的１１２个已知ｍｉＲＮＡ和１０个新ｍｉＲＮＡ，其中５８个ｍｉＲＮＡ表达差异显著，１７个ｍｉＲＮＡ上调表达，４１个ｍｉＲＮＡ下调表达。对所有ｍｉＲＮＡ进行勒基因预测，共得到２２２４条勒基因。使用ｇｅＮｏｒｍ、ＮｏｍｉＦｉｎｄｅｒ和ＢｅｓｔＫｅｅｐｅｒ软件对１１个玉米候选内参基因进行稳定性分析，发现ｍｉｃｒｏＲＮＡ总体比其他候选内参基因稳定，选择相对稳定的－ｚｍａ－和ｍｉＲ】７Ｉａ为内参基因进行后续研宄。随机挑选１１个ｍｉＲＮＡ进行ｑＲＴＰＣＲ的验证一，发现除与建库结果不相符

5、外ｍｉＲＮＡ与文库中的表达趋势均，其余致。对Ａ９个己知ｍ－ｉＲＮＡ进行靴基因ＲＴＰＣＲ的上述１１个ｍｉＲＮ中的ｑ分析，发现在不同组织中，地下组织中的多数ｍｉＲＮＡ的响应程度大于地上组织；在不同处理程度中ｍｉＲＮＡ有随处理强度加大响应加大的趋势，且整；勒基因对中度和重度胁迫有较强的响应体上与其相应的ｍｉＲＮＡ呈负相关关系，符合ｍｉＲＮＡ对勒基因的调控规律。最后，对１１个ｍｉＲＮＡ和１０个勒基因进行上游顺式作用元件分析，发现含有大量与胁迫应答和激素应答有关的顺式作用元件。关键词：ｅａｗａＡｓＬｍｉｃＮＡ非生物胁迫．ｒｏＲ因定量ＰＣＲ；玉米（Ｚｊ）；；内

6、参基；实时－－Ｉ共胁迫下玉米幼苗ｍｉｃｒｏＲＮＡ文库的分析与验证ＴｈｅｍｉｃｒｏＲＮＡＬｉｂｒａｒｉｅｓＡｎａｌｙｓｉｓａｎｄＶｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＭａｉｚｅＳｅｅｄｌｉｎｇｓＵｎｄｅｒ－ＣｏｓｔｒｅｓｓＡｂｓｔｒａｃｔＤｒｏｕｇｈｔｓａｌｔａｎｄａｌｋａｌｉａｒｅｔｈｒｅｅｏｆｔｈｅｍａｏｒａｂｉｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓｅｓａｄｖｅｒｓｅｌａｆｆｅｃｔｉｎｌａｎｔ，ｊｙｇｐ＇ｒｏｗｔｈｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔａｎｄｒｏｄｕｃｔｉｖｉｔ．Ｍａｉｚｅｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｗｏｒｌｄｓｍｏｓｔｉｍｏｒｔ

7、ａｎｔｃｒｏ．Ｔｈｅｇ，ｐｐｙｐｐｃｕｒｒｅｎｔｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｄｒｏｕｇｈｔ，ｓａｌｔａｎｄａｌｋａｌｉｓｔｒｅｓｓｅｓｉｎｍａｉｚｅｈａｖｅｂｅｅｎｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｆｏｃｕｓｅｄｏｎ－ｔｈｅｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｔｒｅｓｓｗｈｌｅｃｏｔｒｅｓｓｈａｓｒａｒｅｌｂｅｅｎｓｔｕｄｉｅｄ．ＭｉｃｒｏＲＮＡｓｍｉＲＮＡｓａｒｅｉｓｙ（）ｃ－ｌａｓｓｅｓｏｆｎｏｎｃｏｄｉｎｓｍａｌｌＲｓｔｈ