鼻咽癌转移的线粒体蛋白质组研究

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1、中图分类号UDC博士学位论文学校代码!Q533密级垒珏鼻咽癌转移的线粒体蛋白质组研究MitochondrialProteomicsofNasopharyngealCarcinomaMetastasis作者姓名：刘健平学科专业：病理学与病理生理学研究方向：肿瘤蛋白质组学学院(系、所)：肿瘤研究所指导教师：陈主初教授答辩委员会主席中南大学二0一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包

2、含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：日期：互兰丛年型月堕日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：日期：址年4月业日一芋啦

3、护仃程弋签师导砧生1奄乏一汪，■互本课题受如下基金资助：>国家基础研究基金(2011CB910704)>国家自然科学基金(30973289)lI博士学位论文中文摘要摘要鼻咽癌转移的线粒体蛋白质组研究目的：分析和鉴定鼻咽癌转移中线粒体蛋白质组的改变，筛选与鼻咽癌转移相关的线粒体蛋白质，为进一步揭示它们参与鼻咽癌转移的分子机制和找寻与鼻咽癌转移相关的特异性分子标志物提供基础。方法：分别从鼻咽癌5．8F和6．10B细胞中分离线粒体，鉴定其纯度，提取线粒体蛋白质。经2D．DIGE技术找出两种细胞的线粒体差异蛋白质，进行MALDI—TOF和

4、ESI．Q．TOF质谱分析，查询数据库鉴定。同时采用生物信息学方法对线粒体差异蛋白质进行GO功能富集分析和蛋白质相互作用网络构建。并对鼻咽癌5—8F细胞中表达上调的部分线粒体差异蛋白质进行siRNA瞬时干扰，Transwell迁移实验观察细胞运动能力的变化。结果：包括PRDX3和SOD2在内的16种线粒体差异蛋白质得到鉴定。在鼻咽癌5．8F细胞中抑制PRDX3的表达能够提高细胞的运动能力。GO功能富集分析显示生物学过程主要表现在细胞对活性氧应答反应、过氧化氢代谢过程、线粒体膜电势调控、细胞氧化还原动态平衡和氧化还原作用等5个方面；

5、分子功能主要表现在氧化还原酶活性、半胱氨酸蛋白酶抑制剂活性、过氧化物酶活性、质膜通道蛋白活性和抗氧化剂活性等5个方面。经过数据挖掘，构建了一个线粒体差异蛋白质相互作用的网络。结合肿瘤．间质共演变假说的观点进行分¨T博士学位论文中文摘要析，初步揭示了PRDX3、PRDX6、SOD2、ECHl、SERPINB5、COX5A、PDIA5、EIF5A、IDH3B和PSMC4等10种线粒体差异蛋白质参与鼻咽癌转移的可能分子机制，为氧化应激直接促进肿瘤转移的观点提供了实验证据。结论：共鉴定了16种线粒体差异表达蛋白质，初步揭示了其中10种参与

6、肿瘤转移的可能分子机制。在鼻咽癌5—8F细胞中抑制PRDX3的表达能够提高细胞的运动能力。它们有可能成为鼻咽癌转移的分子标志，在线粒体氧化应激诱导的鼻咽癌转移过程中发挥重要作用。关键词：鼻咽癌；肿瘤转移；线粒体；氧化应激；蛋白质组；差异表达蛋白质；功能富集分析；数据挖掘；PRDX3。博士学位论文英文摘要MitochondrialProteomicsofNasopharyngealAbstractCarcinomaMetastasisBackground：Mitochondrialproteomicalterationsofnaso

7、pharyngealcarcinomametastasisremainunknown．Ourpurposeistoscreenmitochondrialproteinsfortheelucidationofthemolecularmechanismsofnasopharyngealcarcinomametastasisandthediscoveryofmetastasis。relatedbiomarkers．Methods：Mitochondriawereisolatedfromnasopharyngealcarcinomamet

8、astatic(5．8F)andnonmetastatic(6一lOB)celllines，respectively．Aftercharacterizationofisolatedmitochondria，mitochondrialdifferen