“脾为生痰之源”在肺系疾病中的实质研究

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1、提要本课题从有形之痰角度研究脾虚和健脾药物对肺系痰证COPD模型大鼠粘液分泌 的影响，并观察脾虚和健脾药物对模型大鼠免疫炎症、氧化应激、营养、细胞凋亡等 指标的影响，从免疫炎症机制、氧化应激机制、营养机制、细胞凋亡等方面探讨脾虚 生痰的机制，以揭示在肺系痰证中“脾为生痰之源”理论的实质，深化对其的理解与 认识，为该理论指导临床实践、拓展应用范围提供新的思路和理论依据。选取48只健康Wistar大鼠，随机分为以下4组：空白对照组、COPD模型组、 大黄致脾虚COPD模型组、六君子汤健脾治疗组，采用烟熏加气

2、管滴注脂多糖的方法 复制COPD模型，采用灌服大黄作为致使脾虚的方法，采用灌服六君子汤作为健脾的 方法。观察指标：1.观察大鼠咳嗽，气喘，口鼻分泌物，活动状况，毛发光泽度，粪 尿，食量，体重等一般情况；2.计算造模前后大鼠体重的变化；3.肺组织外观；4. 酚红排泄实验观察各组大鼠气道粘液的分泌情况；5.收集支气管肺泡灌洗液并进行细 胞分类计数；6.计算脾脏指数；7.观察各组大鼠HE染色的肺组织病理改变；8.采用 免疫组化法测定各组大鼠粘蛋白(MUC5AC)的表达；9.放射免疫法测肺组织匀浆IL-2、 T

3、NF-α含量；10.放射免疫法测血液中丙二醛（MDA）含量；11.TUNEL法检测肺组织 细胞凋亡指数。应用SPSS11.5统计软件对实验数据进行统计学处理。本实验以酚红排泄量和肺组织MUC5AC表达量作为肺内有形之痰的测量指标，以 肺组织匀浆TNF-a含量和肺泡支气管灌洗液细胞分类计数作为评估肺内炎症水平的 指标，以脾脏指数、肺组织匀浆IL-2含量作为评估肺部免疫状况的指标，以体重变 化作为评估模型营养状况的指标。本实验研究发现，脾虚对COPD模型动物以上各指 标的影响有显著差异，健脾药物六君子汤对以

4、上各指标也有不同程度的影响。 研究结果表明，COPD模型存在粘液高分泌，脾虚可进一步加重粘液高分泌，健 脾中药六君子汤可显著减轻气道粘液高分泌，并且对免疫炎症指标、氧化应激指标、 营养指标、细胞凋亡等指标亦有明显影响，提示脾虚和健脾中药可能通过免疫炎症机 制、氧化应激机制、营养机制、细胞凋亡机制等方面影响COPD大鼠模型的气道粘液 分泌。我们认为，神经机制、变态反应机制、胃食管返流、一些特殊食物等也参与了 中医理论中认为的“脾脏病变可影响肺脏和肺脏痰证”这一病机变化。以上是对“脾 为生痰之源”理论在肺系

5、疾病中的实质进行的现代解读。关键词脾为生痰之源；肺系疾病；脾虚；粘液高分泌；MUC5ACEssentialresearchon“Piasthesourceofsputum”inFeidiseasesSpeciality:MedicalDepartmentOfTCMAuthor:MaTengzhouaTengzhouTutor:Prof.ZhangWeiProf.ZhangWeiAbstractInthissubjectweresearchtheinfluencesofPixuandJianpidrugs

6、onmucussecretioninratmodelofCOPD,andobservetheinfluencesofPixuandJianpidrugstoindicatorsofimmune-inflammation,oxidation,nutrients,apoptosis,andexploremechanismsof“Piasthesourceofsputum”fromthepointsofimmune-inflammatory,oxidation,nutrition,apoptosis,tore

7、vealtheessenceof“Piasthesourceofsputum”,toprovidenewideasandtheoryforunderstandingoftheclassictheory,guidingclinicalpractice,expandingthescopeofapplication.Intheexperiment,48ratswererandomlydividedinto4groups:blankcontrolgroup,COPDmodelgroup,COPDwithPixu

8、modelgroupcausedbyrhubarb,JianpitreatmentgroupwithLiujunziTang.WeusesmokeandtrachealinstillationoflipopolysaccharidetocopyCOPDmodel,userhubarbgavagetocopypixumodel,useLiujunziTanggavageasmethodofJianpi,36dayslater,gatherth