白蔹抗肿瘤活性部位化学成分及其含量测定研究

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1、湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：1之f趁≯，)年厂月谚关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布

2、学位论文的全部或部份内容，可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。(保密论文在解密后遵守此规定)论文作者签名：彳戈7乞导师签名：衙务7扣弘哆年r月澎日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯I前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1第一章白蔹有效物质部位抗肿瘤活性筛选研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21提取分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．22白蔹抗肿瘤有效物质部位的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8第二章白蔹有效物质部位的化学成分研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91仪

3、器与试药⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．92白蔹活性成分的分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．103结构鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯124讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．175本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．18第三章单体化合物的抗肿瘤活性筛选⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．191仪器和试药⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．192单体化合物的抗肿瘤活性研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯203讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．224本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22第四章白蔹药材主要成分的含量测定研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．231仪器与试

4、药⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．232方法与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．233讨论⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．314本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31第五章结语与创新⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33i主要研究结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．332本文的创新之处⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯333展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．34第六章综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯351白蔹的研究概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯352中药抗肿瘤有效成分研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．423中医药抗肿瘤研究进展及思考⋯⋯

5、．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．474本文研究目的与研究思路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．51参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52已发表文章⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．55致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．56摘要恶性肿瘤是目前危害人类健康和生命的最严重疾病之一。目前临床用于治疗肿瘤的药物多为化学合成药，其毒副作用强和产生耐药性等问题严重影响临床疗效。因此，从中药、天然药物中发掘高效、低毒的新抗肿瘤药物，成为药物研究工作者关注的热点。中药白蔹为葡萄科蛇葡萄属植物白蔹(AmpelopsisjapoMc(Thumb．)Makino)的干燥块根，

6、其味苦、辛，微寒，具有清热解毒、消痈散结、敛疮生肌等功效，用于疔疮，痈疽发背，瘰疬，烧烫伤等疾病的治疗。现代药理研究表明该药具有抗菌、免疫调节及抗肿瘤等作用，本实验室前期研究已经证实白蔹有较好的抗肿瘤作用。历代本草记载白蔹无毒，本实验室对白蔹不同组分的小鼠急性毒性实验结果亦显示其安全性高。因此，白蔹是一种值得关注的潜在低毒抗肿瘤中药。本研究采用生物活性指导下的有效成分分离方法，研究了白蔹抗肿瘤活性部位的化学成分，并对药材进行了质量标准提高研究，为抗肿瘤中药新药开发及完善白蔹药材质量标准提供了科学依据。本文主要完成了以下工作：I、采用MTT法，选择前

7、期研究筛选出的敏感细胞株人肝癌细胞株HepG2细胞，对白蔹醇提物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水溶液部位进行体外抗肿瘤活性筛选。实验结果表明，白蔹乙醇提取物萃取部位中抑制肿瘤活性最强的为乙酸乙酯部位，石油醚及正丁醇部位也同样具有一定的抗肿瘤作用。2、采用硅胶柱层析，依次用四种不同极性的溶剂(石油醚、乙醚、乙酸乙酯、甲醇)作为洗脱剂对抗肿瘤活性部位进行粗分离，得到四个极性不同组分。活性筛选结果显示，乙醚和乙酸乙酯部分的抗肿瘤活性较其它两个部分更好，其中，乙醚部分抗肿瘤活性最佳。3、利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶(LH．20型)柱色谱、制备型HPLC等色谱分

8、离技术，以抗肿瘤活性筛选试验结果为依据，从乙醚和乙酸乙酯洗脱组分物质中共分离出9种单体成分(化合物i-9)。通过1HⅧ、1