早产兔生发基质-脑室出血后脑组织caspase-3及vegf的动态研究

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4、本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：够穸广导师签章：≥，匡知l，年3具目录mIilIIIIIlU11111IIIIIIIII．1111．111IY2337462中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文早产兔生发基质一脑室内出血后脑组织Caspase．

5、3及VEGF的动态研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．88刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27讨论⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．32参

6、考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33综述早产儿生发基质．脑室内出血发生机制及生发基质．脑室内出血继发脑损伤机制研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36致j射⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47中文摘要早产兔生发基质一脑室内出血后脑组织Caspase-3及VEGF的动态研究摘要目的：早产儿生发基质．脑室内出血(germinalmatrixhemorrhage．intraventricu

7、larhemorrhage，GMH-WH)及其导致的神经系统后遗症是造成早产儿死亡和儿童神经系统功能障碍的常见疾病，我国早产儿GMH-IVH的发生率明显高于发达国家，发生率为56．6％，其中重度出血发生率为16．3％，且存活者约35％遗留慢性神经系统功能障碍，如脑瘫、癫痫、学习困难和认知异常等。目前研究显示GMH-IVH后的继发性脑损伤机制十分复杂，涉及炎症反应、氧化应激、小胶质细胞增生等多方面，但众多因素之间有无关联?有无最终共同途径等目前尚无定论。有动物实验研究报道，成年大鼠发生急性创伤性脑

8、损伤时伴有神经细胞凋亡，并且神经细胞凋亡与天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶．3(Caspase．3)表达间具有一致性，因此，有学者提出神经细胞凋亡可能是颅脑创伤后继发性脑损伤的最终途径，但是关于新生动物脑损伤后，尤其是新生早产动物方面，是否有Caspase一3参与，类似研究少见。血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfact：；pr，VEGF)，其在脑损伤后发挥的促进新生血管生成、抗细胞凋亡二保护缺血脑组织的作用已在成年动物模型中得到广泛验证，但是关于早产动物脑损伤后，

9、尤其是新生的早产动物方面，是否亦有VEGF的参与并发挥脑保护作用，尚无相关报道。本实验旨在通过动态监测早产兔GMH-VH后脑组织Caspase．3及VEGF的表达及变化情况，探寻两者是否参与早产兔GMH-IVH后的继发性脑损伤，为早产儿GMH．IVH的治疗提供新的思路。方法：1．将孕29天孕兔进行剖宫产，迅速取幼兔，并给予保温、奶粉喂养。将所取幼兔随机分为实验组及对照组，每组各取18只早产兔。于生后3小时，实验组的早产兔接受50％丙三醇腹腔注射，剂量为10ml／Kg，对照组的早产兔接受等剂量生理

10、盐水腹腔注射。2．对照组与实验组早产兔分别于生后24小时接受头颅超声检查，观中文摘要察GMH-IVH发生情况。选取接受丙三醇腹腔注射后发生GMH．IVH的早产兔15只，编为GMH-IVH模型组。将GMH．IVH模型组和对照组正常早产兔(15只)分别随机分为生后24小时、48小时、72小时三个亚组，按上述时间点给予安乐死，迅速分离脑组织，选取脑室周边区域组织并制成蜡块，用切片机切成5微米厚的切片，供免疫组化和检测凋亡用。3．免疫组化法检测GMH．IVH模型组与对照组早产兔脑室周边区域组织的Casp