解磷细菌的筛选鉴定及对植物生长的影响

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1、分类号：密级：UDC：编号：河北工业大学硕士学位论文解磷细菌的筛选鉴定及对植物生长的影响论文作者：谢晨星学生类别：全日制专业学位类别：专业硕士领域名称：生物工程指导教师：史延茂职称：研究员黄亚丽研究员资助基金项目：河北省科技计划项目（项目编号：14236808D-8）ThesisSubmittedtoHebeiUniversityofTechnologyforTheMasterDegreeofBiochemicalEngineeringScreeningandIdentificationofPhosphate-solubil

2、izingBacteriafromSoilandItsEffectsonPlantGrowthbyXieChenxingSupervisor:Prof.ShiYanmaoProf.HuangYaliMay2016ThisworksupportedbytheScienceandtechnologyprojectofHebeiprovince.No.14236808D-8摘要解磷微生物（PSM）是一类可以将土壤中难溶磷酸盐化合物转化为容易被植物体吸收利用的可溶性磷酸盐，提高植物尤其是农作物对磷肥利用率的一类微生物的统称，其在生态

3、圈中磷素循环相关的生态系统中担任着非常重要的角色。本研究从石家庄、邯郸、邢台、哈尔滨等地植物根际土中采集了30份土壤样本，采用逐级稀释的方法在无机固体解磷平板上筛选出了188株具备一定解磷能力的解磷菌，通过解磷能力的比较，一株标号为H9的解磷细菌具有较高的解磷活性，其在解磷固体平板上的D/d值达4.4，在液体解磷培养基中培养120h，上清液可溶磷含量最高可达481.3mg/L，解磷效率可达4.813％。经过生理生化性质和16SrDNA测序结果分析，H9为Pseudomonasbrassicacearum。通过对其在LB培养基

4、中的培养条件及在解磷培养基中解磷特性的测定得知，H9在LB培养基中的最适pH为7，最适温度为28℃，最适的装液量为50ml/100ml，在0-80g/L的NaCl浓度下均可以正常生长；在无机解磷培养基中H9的最适碳源是葡萄糖，最适氮源为硫酸铵，最适的培养温度为20-37℃，最适的初始pH值为6-9。小麦、黄瓜种子浸种实验结果分析，一定浓度的H9菌悬液可以显著促进小麦种子萌发及胚根胚芽生长，H9同样可以显著促进黄瓜种子的萌发。使用山区土壤的盆栽试验结果表明，接种H9黄瓜苗株高、叶宽、鲜重、生物量均显著的高于未处理对照组，且土壤

5、中的全磷、速效磷含量也有不同程度的增加。使用蛭石和混合基质的盆栽试验表明，用H9菌液的处理黄瓜苗株高、叶宽等指标同样显著高于未处理对照组，说明解磷菌在不同的基质土壤中的促生活性依然存在。作为解磷促生新机理的探究，又对H9做了相关的实验。内生菌检测实验结果表明，H9可以在一段时间内在黄瓜植株内定殖。信号分子检测实验表明H9可以分泌群体感应信号分子，为进一步的理论研究奠定基础。关键词：解磷细菌；促生；盆栽试验；信号分子IABSTRACTPhosphatesolubilizingmicroorganismsisakindofmic

6、roorganismswhichcantransformnon-solublephosphateintoavailableforms.Itcanimprovethephosphorusnutritionofplants,andtakeanvitalpartinphosphoruscyclingintheeco-system.Aftercollectionof30rhizospheresoilsamplesfromseveraldistrictsincludingShijiazhuang,Xingtai,HandanandHa

7、rbin,188phosphate-solubilizingbacteriastrainswereisolatedonthemodifiedselectedmediumusingcascadedilutionfromthesesamples,amongwhichonestrainnamedH9withthebestabilitytosolubilizeinorganicphosphatewasfurtherscreened.TheD/dratioofstrainsH9intheinorganicsolidculturemed

8、iumwas4.4.Thecontentofsolublephosphorusinsupernatantreachedupto481.3mg/LaftercultivationofstrainsH9for120hinliquidphosphate-solubilizingmedium.Ac