mirna-214通过靶向β-catenin通路抑制肝癌生长

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1、分类号：R575学校代码：10392学科专业代码：100201学号：1101003003福建医科大学博士研究生毕业论文miRNA-214通过靶向β-catenin通路抑制肝癌生长miRNA-214inhibitshepatocellularcarcinomagrowthbytargetingβ-cateninpathway学位类型：医学博士所在学院：第一临床医学院研究生：王晓君学科、专业：内科学导师：江家骥教授研究起止日期：2011年4月至2012年12月答辩日期：2013年6月13日二○一三年六月1目录英文缩略词表……

2、………………………………………………………..…2中文摘要……………………………………………………………..…..…3英文摘要……………………………………………………………….……5前言………………………………………………..…………………........8第一部分miR-214在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达……………........….10材料与方法...………………………………………………………………..….10结果……………………………………………….……………………..…..….13讨论…………………………………

3、…………….……………………........….14第二部分miR-214慢病毒载体构建包装与稳定细胞株的建立………………….17材料与方法...………………………………………………………………..….19结果……………………………………………….……………………..…..….23讨论……………………………………………….……………………........….26第三部分miR-214对肝癌生长的影响.........................................................…....

4、.....28材料与方法...………………………………………………………………..….28结果……………………………………………….……………………..…..….30讨论……………………………………………….……………………........….34第四部分miR-214抑制肝癌细胞生长的机制..........................................................36材料与方法...………………………………………………………………..….36结果……………………………………………

5、….……………………..…..….49讨论……………………………………………….……………………........….59结论…………………………………………………………………………….…….63参考文献……………………………………………………......................................64综述……………………………………………………………………………….….69致谢……………………………………………………………………………….….822英文缩略词表cDNAComplementaryDNA互

6、补DNACDSCodingSequence编码序列CMVCytomegalovirus巨细胞病毒DEPCDiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯DMEMDulbecco’sModifiedEagleMediumDMEM培养基EDTAEthylenediamineteraaceticacid2-二乙胺四乙酸FBSFetalBovineSerum胎牛血清GFPGreenfluorescenceprotein绿色荧光蛋白HCCHepatocellularcarcinoma肝细胞癌miRNAMicroRNA微小RNA

7、PAGEPolyAcrylamideGelElectrophoresis聚丙烯凝胶电泳PBSPhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲液PCRPloymerasechainreaction多聚酶链反应RISCRNA-inducedsiliencingcomplexRNA诱导的沉默复合物RT-PCRReversetranscriptasePCR反转录PCRshRNAshorthairpinRNA短发夹RNAUTRUntranslatedRegions非翻译区3miRNA-214通过靶向β-catenin通路抑

8、制肝癌生长中文摘要肝细胞癌（Hepatocellularcarcinoma，HCC）是人类最常见的恶性肿瘤之一。尽管在肝癌的治疗中取得了很大进步，肝癌仍是癌症相关死亡的第三大原因，患者的5年生存率不到5％。调查肝癌发生发展的分子机制，对于开发新的诊断、治疗和预后方法具有重要意义。MicroRNA（miRNA）是一类丰