全自动加样器阳性拖带现象研究

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1、全自动加样器阳性拖带现象研究【摘要】目的通过倍比稀释,确定区别anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本(不发生阳性拖带)的临界滴度范围。方法用HAMILTONMicrolabATPlus2全自动加样器对经倍比稀释的anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本(不发生阳性拖带)加样,进行ELISA检测,通过对引起阳性拖带现象的强阳性标本临界滴度和不引起阳性拖带的普通阳性标本临界滴度的比较,找到能区别两者的临界滴度范围。结果区别anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本(不发生阳性拖带)的临界滴度范围为1:2048〜1:4096o结论能够

2、区别anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本(不发生阳性拖带)的临界滴度是存在的,并可通过将疑似阳性拖带的标本按照临界滴度倍比稀释后所得结果来快速判断是否是阳性拖带,这在血液检测工作中具有一定的实际意义。【关键词】全自动加样器;阳性拖带;酶联免疫吸附试验;倍比稀释;临界滴度1材料与方法1.1标本来源2012年8月〜11月长春地区无偿献血者。1.2试剂丙肝抗体ELISA检测试剂盒(厦门新创,批号201206065815),试剂批件合格,并在有效期内使用。1.3仪器HAMILTONMicrolabATPlus2全自动加样器,HAMI

3、LTONMicrolabFAME全自动酶免处理系统。1.4方法1.4.1倍比稀释对anti-HCV强阳性标本和普通阳性标本(不发生阳性拖带)进行1:2、1:4、1:8、1:16倍比稀释。1.4.2加样1.4.2.1强阳性标本的加样根据检测项目和试剂说明书的要求,HAMILTONMicrolabATPlus2控制微机上编制加样程序,由加样器自动加样。在强阳性标本所在行的下一行每个孔内加入2ml正常标本。1.4.2.2普通阳性标本的加样同1.4.2.Io1.4.3酶免反应将加完样的酶标板放入MicrolabFAME,自动进行ELIS

4、A检测并判读结果。2结果在对血液的酶联免疫检验中,用电脑控制的全自动加样系统来处理样本,可以快速、准确及分配一致性的处理大量样本,避免了人工加样的误差。但因使用非一次性加样针,在加样过程中遇到高浓度抗原、抗体标本,可能会出现对其后几孔的连续污染,即阳性拖带现象。现通过倍比稀释不同浓度标本并用ELISA检测的方法对此现象进行分析如下,具体见1。2.1引起阳性拖带的强阳性标本和其下一行正常标本的实验结果,三个强阳性标本造成了不同程度的阳性拖带现象。2.2不引起阳性拖带的普通阳性标本的实验结果,在相同滴度条件下,强阳性标本的0D值大于

5、普通阳性标本,这说明能引起阳性拖带现象的标本所含的anti-HCV含量高于不引起拖带的标本。进一步对强阳性标本和普通阳性标本进行倍比稀释实验结果,在同样两个相邻滴度间,强阳性标本0D值的下降幅度大于普通阳性标本。2.3对10个不同滴度的强阳性标本和普通阳性标本的0D值进行秩和检验,实验结果可以看出,在滴度为1:2048〜1:4096之间,6

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