枣外源小麦磷转运蛋白基因(tapt2)遗传转化研究

《枣外源小麦磷转运蛋白基因(tapt2)遗传转化研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：S鱼壹5：!密级：公五单位代码：!QQ篓鱼学号：2Q!Q31Q枣外源小麦磷转运蛋白基因(御刀)遗传转化研究Agrobacterium--mediatedtransformationofChinesejujubewithTaPT2gene学位申请人：指导教师：学科专业：学位类别：授予单位：答辩日期：魏薇刘孟军教授王玖瑞教授果树学农学硕士河北农业大学二。一三年六月三日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不

2、包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑兰垦垒些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：沙侈年6月，Et学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑些盛些盘堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑兰垦壅些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编

3、学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：导师签名：签字日期：2夕房年6月，日签字日期：鲫乃年f月，日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：摘要枣(ZiziphusjujubaMill．)原产我国，是我国当今第一大干果树种。磷素是植物必需的大量营养元素。土壤易出现缺磷现象，磷转运蛋白是介导植物对磷素吸收和转运的主体，在调控植株磷素吸收和利用效率中具有重要作用。通过农杆菌介导方法转化枣，以期获得可以高效吸收利用磷素的优良耐缺磷转基因植株。本试验建立了枣叶片不定芽高效再

4、生体系，并实现了根癌农杆菌介导的TaPT2小麦磷转运蛋白基因基因转化，获得了枣转基因植株。主要试验结果如下：1．建立了枣叶片不定芽高效再生体系。冬枣、月光枣、木枣3个品种叶块在愈伤诱导培养基MS+麦芽糖20eeL+琼脂5g／L+TDZl．0mg／L+IBAO．1mg／L+AgN031．0mg／L上出愈率均可达到100％，差异不显著。在芽分化培养基MS+蔗糖30∥L+琼脂5g／L+6．BA0．8mg／L+IBA0．2mg／L上，冬枣和月光枣不定芽出芽率显著高于木枣，2个品种出芽率均超过了93％，而木枣仅为66

5、．63％。芽分化培养基附加不同GA3、6-BA、TDZ时，不定芽发生晴况差异明显。附加6-BA的培养基MS+蔗糖30∥L+琼脂5∥L+IBA0．2mg／L+6．BAO．8～1．2mg／L，可防止不定芽玻璃化，每叶块出芽率和平均出芽数分别可达93．3％和3．53个。此外，乙酰丁香酮100mg／L可显著促进冬枣叶块不定芽发生，平均出芽数可高达7．30个，当乙酰丁香酮达到200mg／L时，会导致再生不定芽的畸形。2．确定了枣叶片再生临界选择压。附加除草剂Basta0．4mg／L时，叶块不产生不定芽但不会停止分化，

6、可作为叶片再生临界选择压。0．6mg／L作为茎段生长选择压，该系统能有效进行筛选。3．建立了木枣叶片遗传转化体系。适宜的遗传转化条件为：叶片切割后针刺处理，预培养l天后，在OD600为0．6--0．8的菌液中侵染5min，在24"C条件下，在培养基MS+琼脂5g／L+麦芽糖209／L+TDZ1．0mg／L+IBAO．1mg／L暗中共培养1-3d。抗性愈伤组织诱导率为8．75％。4．首次将小麦TaPT2基因转入到木枣中，获得了22个阳性植株，初步证实外源基因成功整合到枣树基因组中，并结合低磷胁迫下植株表型特征

7、与磷含量验证了其中2个植株的外源基因已获得表达。关键词：枣；叶片再生；根癌农杆菌介导；遗传转化；TaPT2基因Agrobacterinm—mediatedtransformationofChinesejujubewithTaPT2geneMasterCandidate：WreiW越Supervisor：Prof．LiuMeng-junProf．WangJiu-ruiMajor：PomologyAbstractChinesejujube(ZiziphusjujubaMill．)isnativetoChinaw

8、hereithasbeenthemostimportantdryfruit．Phosphorusisoneofthenecessarymacronutrientsforplants．Thesoilisalwayslackofphosphate．Thephosphatetransporters，mediatorsinplantsusedforPiuptakeandtransportation，playanimpor