32p敷贴对幼鼠局部皮肤及远处组织器官(皮肤、脾脏)损伤的研究

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时间:2019-03-02

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3、对于幼龄群体者则相当匮乏;研究也多局限于敷贴局部组织,而对于机体远处组织脏器的研究却很少,对临床指导意义有限。为进一步研究”P同位素敷贴在婴幼儿中使用的安全性,我们采用临床上”P敷贴治疗的方法,建立SD幼鼠”P敷贴模型,从外观及组织DNA损伤角度检测32P敷贴对幼龄SD大鼠局部皮肤及远处组织器官的损伤及影响。实验方法:l、动物模型的建立:参考临床方法,利用32P溶液及滤纸,制作简易”P敷贴器,贴敷于鼠龄6天的SD幼鼠背部皮肤。对照组使用生理盐水替代”P溶液。2、WesternBlotting方法检测DNA损伤应答蛋白ATM、H2AX、P53..采用不同活度(09Ci、5I.tCi、251

4、,tCi、125p,Ci),分别作用6h\:24h\96h。提取靶器官组织总蛋白,使用westernblotting检测局部皮肤、远处皮肤(距敷贴边缘0.5cm以外)及脾脏组织DNA损伤应答蛋白总体磷酸化水平,探讨敷贴对SD幼鼠局部及远处组织DNA损伤水平。3、彗星实验检测脾脏组织DNA损伤水平实验结果:1、32P敷贴对局部皮肤及远处组织外观的影响(1)敷贴24h后,至中、大剂量可见局部皮肤随剂量增加颜色逐渐变红,甚至变苍白;(2)敷贴96h再观察半月,各剂量组局部皮毛生长明显受到抑制,并出现放射性皮炎,且呈现剂量依赖关系,对照组则未见损伤表现;(3)敷贴96h后观察1个月,各剂量组局部

5、皮毛一定程度的恢复,但高剂量组后背变形仍存在,且部分实验鼠还出现会阴部溃烂、后肢瘫痪,死亡等并发症,对照组未见损伤表现;II摘要(4)高剂量组敷贴96h,次月重复一次,观察3个月后可见会阴溃烂更加明显,下肢瘫痪、活动受限,还可见部分鼠死亡。2、船P敷贴对局部皮肤ATM、P53蛋白表达水平的影响:(1)ATM表达水平改变a)”P敷贴各剂量组ATM、PATM表达水平均较对照组明显增高(P

6、3磷酸化比值(PP53/P53)均明显增高(P<0.05)。b)作用6h后,P53磷酸化比值各剂量组间无统计学差异(P>0.05);作用24h后,在0—25uCi,呈现剂量依赖性(P<0.01),继续增加至125uCi时反稍有下降;作用96h后,则呈现明显剂量依赖性(P<0.01)。3、westernblotting检测32P敷贴对远处皮肤ATM的影响:a)与对照组相比,ATM、pATM表达水平均升高(P

7、(P<0.01)。4、32P局部敷贴对SD幼鼠脾脏DNA损伤影响(1)彗星实验结果a)各剂量组OTM较生理盐水组均有不同程度的增高(P

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