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1、64生物技术2011年21(2)一种产甲烷优势菌群的筛选方法1112张云茹,刘逸轩,沈庆涛,王永忠(1.重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;2.重庆大学工程热物理研究所,重庆400030)摘要:目的:用简便易行的产甲烷优势菌群的筛选方法,筛选出能够人工培养的且高效产甲烷的复合微生物。方法:用乙酸钠除氧培养基驯化富含产甲烷菌的厌氧活性污泥,逐渐增加驯化体系中培养基和菌液的比率,使驯化体系中微生物菌群适应人工培养条件。结果:筛选出4个产甲烷优势菌群。筛选出的1号、2号、3号、5号菌群在培养7d后均产甲烷量分别达到46mL、38mL、51m
2、L、38mL,在短时间内4个菌群产甲烷量能持续稳定上升。结论:验证表明建立的方法筛选高效产甲烷菌群简便易行,为沼气工作者提供了一定的参考。关键词:产甲烷菌;筛选;驯化;乙酸钠;优势菌群中图分类号:Q89;Q93-33文献标识码:Adoi:10.3969/j.issn.1004-311X.2011.02.051AMethodofScreeingPreponderantMethanogenicBacteria1112ZHANGYun-ru,LIUYi-xuan,SHENQing-tao,WANGYong-zhong(1.SchoolofPharmacy
3、&Bioengineering,ChongqingUniversityofTechnology,Chongqing400054;2.InstituteofEngineeringThermophysics;ChongqingUniversity,Chongqing400030,China)Abstract:Objective:Aneasilynewmethodwaspresentedtoselectpreponderantmixedmethanogenicbacteriawhichcouldproducemeth-aneefficientlyandb
4、ecoutrledindefinedmedium.Method:Anaerobicactivatedsludgerichinmethanogenicbacteriawasdomesticatedinanaerobicmediumwithsodiumacetateasitssolecarbonsource.Duringthedomesticationtheratioofthemediumandthebacilliwasgrad-uallyincreasedenablethemicroorganismtoadapttotheartificialcult
5、ureconditions.Result:4preponderantmethanogenicbacteriawereobtainedbythewayandnamedmethanogenicbacteria(MB)1,MB2,MB3,MB5.Themethaneyieldof4dominantmicroorganismsreached46mL,38mL,51mL,38mLseparatelyafterculturing7daysinartificialmedium.andcouldincreasecontinuouslyandsteady.Concl
6、usion:Thenewmethodofselectingmethanogenicbacteriawasverifiedtobefeasibleandeasyandprovidesomereferencematerialforbiogas-re-searchworker.Keywords:methanogenicbacteria;screen;domestication;sodiumacetate;dominantmicroorganisms0引言筛选到4个产能持续稳定产甲烷的优势菌群,为产甲烷菌群沼气发酵是一个微生物协同作用的过程,由多种产甲烷的
7、人工培养提供了一定的参考。细菌与非产甲烷细菌相互作用、相互制约共同完成。产甲烷1材料与方法菌是沼气发酵微生态系统中食物链末端的一群成员。在厌氧1.1材料条件下,产甲烷细菌利用非产甲烷细菌的中间产物和最终代1.1.1实验材料谢产物作为营养物质和能源而生长繁殖,最终产生大量甲烷1号污泥样品取自重庆啤酒厂厌氧消化池,2号污泥样品[1]和二氧化碳等。取自重庆污水处理厂,3号、4号污泥取自重庆光大集团不同所有的产甲烷菌都是专性严格厌氧菌,对氧非常敏感,遇污水处理池,5号污泥样品取自重庆理工大学家属区化粪池。[2]氧后会立即受到抑制,不能生长繁殖,有的还会死亡
8、。长期1.1.2培养基以来,人们对产甲烷菌的分离、培养、分类、生理代谢、细菌结乙酸钠培养基含微量元素、维生素混合液基详见参
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