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1、安徽农学通报,AnhuiA鲥.Sci.Bul1.2010,16(5)59植物微透析取样技术研究进展李日红张伟东姜国斌(1辽宁师范大学生命科学学院,辽宁大连116029;2大连民族学院生命科学学院,辽宁大连116605)摘要:简要介绍了微透析的原理及其在动物、人体上的应用,结合实验室利用微透析技术对植物体进行取样研究,介绍了微透析技术获取植物质外体的方法,论述了微透析技术在植物活体取样中的可行性并对探针的回收率进行探讨。进而为植物生理研究提供更为简单、实用、精细的新方法。关键词:微透析;活体取样;质外体中图分类号$718.43文献标识码A文章编号1007—7731(
2、2010}05—59一o3l微透析系统化规律的可行性。微透析技术是将探针植人生物体内,开动体外微量灌3植物微透析取样流泵使灌流液流经探针头部的半透膜,可通过膜的小分子受到微透析技术在动物及人体上成熟应用的启示,人物质通过扩散进入透析管,使灌流液和组织液中的待测物们开始将微透析技术应用于植物体取样的研究,并且随着质达到一个动态平衡,不断流动的灌流液将待测物由透析对植物生命过程研究的深入,这一技术越来越得到大家的管中带出。微透析的装置包括探头、导管、微量灌流泵、样关注。Eklund将微透析用于活体挪威云杉茎形成层取样品收集器和定量分析仪等,基本的微透析系统示意图详见的
3、实验,试验结果表明微透析作为一种可持续测定树木文献[1]。收集流出的灌流液即透析液,再利用高效液相形成层区域乙烯和玉米素的方法,实现了活体、动态取样,色谱(HPLC)、高效毛细管电泳仪(HPCE)以及质谱(MS)而且取样、测定方法较传统方法简便的多。HuiMin等高灵敏度检测仪器测定透析液中组织细胞外液的待测MA_1叫等通过微透析取样的方法测定出了豌豆、李子果实物的动态变化。中的钙、镁等无机离子;SimonNingsunZhou等探讨了运2微透析技术在动物上的应用用微透析取样的方法测定了青锁龙(一种景天科观赏植目前,微透析技术主要见于人体及实验动物,取样部物)体内
4、的杀虫剂残留物含量;KaboMosetlhaL】等亦通过位几乎遍及体内各种组织,如心、脑、肝、皮肤、血液和肌肉微透析的方法测定了重金属污染土壤中百筋花体内铜镍等。HIDEOTSUKADA等对猴的大脑进行微透析分析的的含量。研究,指出为了除去破碎组织外溢的多巴胺,探针插入2h3.1微透析取样获取质外体汁液植物质外体是由细以后再收集透析液进行测量。神经科学家将脑内微透胞膜外侧构成细胞壁的纤维和微晶体空间以及充满水以析和高灵敏度的微量分析技术联用,实现了对体内胞外环及空气的细胞间隙所组成,分化完成的木质部也属于质外境中化学物质变化的动态监测。在进行活动部位的微透体。它是
5、一个动态空间,许多重要的生理生化过程都在质析取样研究时,动物处于清醒状态,可在观察生理、病理和外体空间进行,如溶质和组织形态的维持、水分运输、维持行为变化的同时检测相应的生化指标,开展分子水平的研内环境的动态平衡、信号转导以及抵抗逆境、光生长与发究。由于可以单独取得细胞外液,特别适合对脑内神经递育、合作用的气体交换等。近年来对植物质外体的研质的释放量进行动态监测。郑瑜宏等通过初次和二次究是植物生理研究的热点,普遍认为质外体及其多肽信使置人微透析探针至大鼠纹状体并收集脑微透析液,结合高的深入研究是全面理解植物细胞生长发育功能及其调节效液棚色谱法检测透析液谷氨酸水平,
6、探讨了微透析探机制的重要途径”。质外体很难从植物组织上剥离下针置人的刺激对大鼠纹状体内谷氨酸水平的影响[53;Ishi.来,特别是活体植物质外体汁液成分的动态分析难以da等采用微透析一液相色谱/荧光检测器检测老鼠脑内实现。的5一羟色胺;刘宁宁等运用微透析技术观察猪深低尽管微透析技术已应用于挪威云杉的茎形成层、豌豆温停循环过程中脊髓神经细胞间液中的各种物质变化,探和李子果实等的取样研究,但未作通过微透析技术讨了脊髓损伤的分子机制;张树栋等探讨了运用微透析来获取植物质外体汁液的研究。王伟等人以盆栽鹅掌柴技术研究兔肾热缺血再灌注损伤后肾皮质葡萄糖浓度变为材料,在活体鹅掌
7、柴嫩茎插入微透析探针后的不同时间基金项目:国家自然科学基金项目(30872004)、辽宁省科学基金项目(2007207005)。作者简介:李日红(1982一),男,山西怀仁人,硕士研究生,主要从事环境生物学研究。通讯作者收稿日期:2010—01—2560安徽农学通报,AnhuiA.Sei.Bul1.2010,16(5)段分别收集透析液,原子分光光度计测定其中的Na及植物微透析取样相对而言有诸多优势:由于探针尺寸K浓度、酶试剂盒测定苹果酸脱氢酶活性。苹果酸脱较小,取样时对植物组织器官损伤极小,基本不会影响组氢酶(MDH)是细胞内特有的一种酶,质外体中不含此织中的生理
8、过程能较为
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