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1、分类号学号M201171490学校代码10487密级硕士学位论文白腐真菌生物降解不同结构氯酚类污染物的研究学位申请人：刘华华学科专业：微生物学指导教师：杨洋教授答辩日期：2014年1月16日万方数据AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofPhilosophyStudyonbiodegradationofchlorophenolswithdifferentstructuresbywhiterotfungusCandidate:LiuHuahuaM
2、ajor:MicrobiologySupervisor:Prof.YangYangHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074，P.R.ChinaJanuary,2014万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版
3、权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日万方数据华中科技大学硕士毕业论文摘要氯酚类物质是一种重要的化工原料，被广泛应用于制造染料、颜料、农药、除草剂、防腐剂、杀虫和杀菌
4、剂等，其废水废渣中残留的氯酚有强烈的三致效应，对人体健康和生态环境有极大的危害。白腐真菌PleurotusostreatusBP2是本实验室保存的一株污染物高效降解菌株，其降解能力与胞外漆酶的产生密切相关，但目前关于该菌株对氯酚类污染物降解的报道较少。本论文主要研究了白腐真菌PleurotusostreatusBP2全细胞及其分泌的漆酶粗酶液对不同结构的氯酚类化合物（单氯酚、二氯酚、三氯酚）及其混合物的降解作用，主要研究结果如下：PleurotusostreatusBP2液体发酵产生漆酶的最佳条件为：摇床培养150r/min，培养温度30℃，培养基初始
5、pH5.5，以葡萄糖作为碳源，酵母浸膏作为氮源，添加丁香醛或ABTS可以有效提高漆酶活力。PleurotusostreatusBP2全细胞能够有效地对不同结构氯酚类化合物进行降解。氯酚降解率与氯酚的化学结构有关：2-氯苯酚（2-CP）、2,6-二氯苯酚(2,6-DCP)和2,4,5-三氯苯酚(2,4,5-TCP)在降解反应10天内降解率均能达到94%以上，3-氯苯酚（3-CP）的降解率为60%左右。降解率还与氯酚的初始浓度有关，随着初始浓度的升高，氯酚的降解率和菌株降解氯酚的反应速率都呈下降趋势。对于较高初始浓度的不同氯酚（500mg/L）反应速率为：
6、K2-CP=0.445>K2,6-DCP=0.283>K2,4,5-TCP=0.112>K3-CP=0.097，反应速率随苯环上氯原子数目升高而降低。PleurotusostreatusBP2处理不同结构的氯酚类物质的化学需氧量清除率在50%左右。添加氯酚后菌株漆酶活力较对照组都有所下降，说明氯酚对漆酶的分泌有抑制作用，不同浓度的氯酚没有诱导PleurotusostreatusBP2产生新的漆酶同工酶。PleurotusostreatusBP2对2,6-DCP和2,4,5-TCP的耐受性较强，对单氯酚的耐受性较弱。PleurotusostreatusB
7、P2分泌的胞外漆酶粗酶液对不同结构氯酚类化合物也具有较好的降解效果。漆酶粗酶液对2-CP、2,6-DCP和2,4,5-TCP的降解率均在90%左右，对3-CP的降解率为70%左右。在反应体系中添加介体丁香醛和ABTS后，漆酶粗酶I万方数据华中科技大学硕士毕业论文液对3-CP的降解率有显著提升。漆酶抑制剂叠氮化钠和曲酸在抑制漆酶活性的同时也抑制了粗酶液对氯酚的降解作用，说明漆酶在粗酶液降解氯酚的过程中起到了重要作用。漆酶活性与4种氯酚的降解率呈正相关，氯酚降解率随着漆酶活性的增加而提高。漆酶粗酶液降解2,4,5-TCP反应所需的活化能为36.56KJ/m
8、ol，漆酶粗酶液催化2,4,5-TCP的反应可以在室温条件下很快发生。Pleurotusost
