麦汁和啤酒的a-氨基氮检测方法

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1、批准：翁益平质量Pillar审核：沈洪武、康黎东编写：李贞编号：Q/SBJ4（品）-2.04.2010版本：第3页共3页名称麦汁和啤酒的α-氨基氮检测方法保密日期：2010年7月12日麦汁和啤酒的α-氨基氮检测方法1.目的1.1用分光光度法比色测定麦汁和啤酒的α-氨基氮。2.范围2.1本方法适用于所有种类的麦汁和啤酒。3.原理3.1茚三酮氧化剂与氨基酸反应被还原成水合茚三酮，氨基酸被氧化脱羧，产生醛、二氧化碳和氨，然后氨水合茚三酮和还原型水合茚三酮反应，生成兰紫色络合物，产生的颜色深浅与游离α-氨基氮含量成正比，在波长570nm下有最大吸收值，可用来比色测定。

2、4.安全及预防4.1穿戴PPE，如隔热手套；身体勿靠近沸水，以免溅出；具塞试管的玻璃塞应盖紧，以免飞溅。4.2操作必须严防任何外界痕迹量的氨基酸引入，因此有关玻璃仪器都必须仔细洗涤，洗涤后只能接触其外部表面，移液管必须用吸球吸。4.3测定中加入果糖等作为还原性发色剂，碘酸钾在稀释液中使茚三酮保持氧化态，以阻止进一步发生不希望的生色反应。5.试剂5.1显色剂：10gNa2HPO4·12H2O(磷酸氢二钠)6gKH2PO4（磷酸二氢钾）0.50g水合茚三酮0.30g果糖批准：翁益平质量Pillar审核：沈洪武、康黎东编写：李贞编号：Q/SBJ4（品）-2.04.2

3、010版本：第3页共3页名称麦汁和啤酒的α-氨基氮检测方法保密日期：2010年7月12日将以上试剂用水溶解后稀释至100mL（此溶液在低温棕色瓶子可保存2周，PH应为6.6～6.8）。5.2稀释溶液：称2g碘酸钾（KIO3）溶于600mL水中，再加96%乙醇400mL，贮存于冰箱。5.3标准溶液：溶0.1072g甘氨酸于100mL水中，在冰箱贮藏。6.仪器设备6.1紫外可见分光光度计UV-2450；6.225mL具塞试管；6.3移液枪：6.4电炉（1000W-2000W）；6.5200mL容量瓶；6.6恒温水浴锅（精度0.5℃）；7.步骤7.1取过滤后的麦芽汁

4、2.00mL，置于200mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。7.2吸取标准液2.00mL，置于各个200mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。7.3依次吸取2.00mL蒸馏水，稀释后的标准液，稀释后的麦芽汁溶液于试管架的试管中（每吸取一样品，移液枪应用该样品润洗3次），并在各试管中加入1.00mL显色剂，混匀，在恒沸水浴中准确加热16分钟，取出在20℃水浴中恒温20分钟。7.4在各试管中加入5.00ml碘酸钾稀释液并摇匀，于30分钟内在570nm波长处用10mm比色皿测定其吸光度，测定时以装蒸馏水试管为空白，装标准液为标准，以后依次为麦汁。批准：翁益平质量P

5、illar审核：沈洪武、康黎东编写：李贞编号：Q/SBJ4（品）-2.04.2010版本：第3页共3页名称麦汁和啤酒的α-氨基氮检测方法保密日期：2010年7月12日8.结果的表示和方法的可靠性样品溶液的吸光度α-N（mg/L麦芽汁）=----------------------------×200标准溶液的吸光度计算结果应保留整数版本作者日期版本说明自前一版本以来的主要的或重要的变更1.0李贞2010-7-12根据VPO的要求编写SOP