淀粉酶活性测定临床应用中的几个问题

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1、淀粉酶活性测定临床应用中的几个问题马志荣1文庆成2通讯作者(1北京大兴医院林校路街道社区卫牛服务中心北京102600;2中国协和医科大学100730)【摘要】人血清中有胰淀粉酶和唾液淀粉酶。胰腺炎患者血清和尿淀粉酶活性升高，当临床遇急腹症，怀疑是胰腺炎时应查AMY活性。多种方法用于测定AMY活性，因测定原理和所用底物的差异,方法间存在系统误差，临床所用参考范围不能在方法间通用。为了提高淀粉酶临床诊断效率，必须注意淀粉酶活性升高临床意义的相对性及分析前质控和分析变异。【关键词】淀粉酶;活性测定;胰腺炎【中图分类号】R597+.2【文献标识码】B【文章编号11003-5028(

2、2013)05-0332-01淀粉酶(Amylase,缩写AMY,英文全称：α-l,4-glucan4-glucanohydrolase,α-l4■葡萄糖4■葡萄糖水解酶，EC3211),它是一种內切葡萄糖昔酶(endoglucosidase)随机作用于淀粉链内部α—1,4糖昔键。实验证明酶水解C1—0键，而不是0—C4键。水解直链淀粉时生成葡萄糖，少量麦芽糖和麦芽三糖；水解支鏈淀粉或糖原时终产物是葡萄糖，麦芽糖，麦芽三糖和α—极限糊精(α—limitdextrin)[l]oAMY作用的最适pH69-70,Ca2+

3、++和Cl-是必须的辅助因子。多种不同检测技术应用到AMY活性测定,当前临床常规仍存在多种方法并存的状况[2]。因测定原理和所用底物的差异,方法间存在系统误差，临床所用参考范围不能在方法间通用•为了提高淀粉酶临床诊断效率，必须注意淀粉酶活性升高临床意义的相对性及分析前质控和分析变异，现仅就临床应用中需注意的几个问题讨论如下。1方法间系统误差与参考范围[3]AMY不同测定方法间因所用底物结构和试剂组成及反应条件的差异，方法间存在系统误差，现将收集到的EG7P与其它几种方法间的回归方程列于表lo表1参考方法EG7P(Y)与其它几种方法(x)间的冋归分析(Y二a+bx)Table

4、3RegressionanalysisbetweenrefereneeEG7P(Y)methodandseveralothermethods(X).表注：亚乙基一对一硝基酚一α-麦芽七糖卄(EG7P)；2—氯一对—硝基酚-α-麦芽七糖苗(CNPG7)；对一硝基酚-α-麦芽五糖昔(PNPG5)；对一硝基酚■α-麦芽四糖昔(PNPG4)；对一硝基酚一α-麦芽七糖昔(PNPG7)；苯甲基一对一硝基酚一α・麦芽五糖昔(BG5P)；2-氯一对一硝基酚一α・麦芽三糖昔(CNPG3)从表1数据可见，目前国

5、内外临床实验室常规AMY测定方法仍然是多种方法并存，AMY参考范围更应强调各实验室建立自己检测系统的参考范围，而不能盲目照搬不属同方法组的参考值。IFCC推荐方法(37°C)测岀的参考范围是31-107U/L,其它部分方法的参考值如表1所列。另外，婴幼儿血AMY活性约为成人的18%o血清AMY平均活性从婴幼儿阶段逐年升高，约经3-4年可达到成年人水平，而男女不同性别间无显著差异［4］。2血清淀粉酶升高临床意义的相对性［5-6］血AMY总活性在急性胰腺炎和唾液腺炎症时升高。AMY活性测定主要用于胰腺炎诊断。急性胰腺炎发作5-8小时AMY活性开始升高；约3〜4天转归正常。峰值一

6、般为参考值上限的4〜6倍，最高可达40倍。急性胰腺炎吋，尿AMY也增高，维持升高可持续7〜10天，图1可供参考。非牒腺炎腹部病变，如阑尾炎、腹膜炎也能引起高淀粉酶血症，唾液腺病变，如感染、幅射损害，外科手术和肿瘤等也能引起唾液腺型(S■型)AMY活性升高以及AMY总活性升高•很多药物如阿斯匹林、可待因、乙醇、吗啡、四环素等可引起血AMY活性升高。另外，常见的AMY升高发生在肾功能障碍吋，特别是肾小球滤过率低于50ml/min的肾功不全患者血AMY可升高至参考范围上限5倍以上。AMY总活性测定因缺乏特异而开发了其它一些实验(如脂肪酶和膜特异淀粉酶同工酶)用于急性腹痛的鉴别诊断

7、。一些研究已证明与这些检验比较,AMY对胰腺炎的诊断率为54%〜83%,诊断灵敏度（真阳性率）和特异性（真阴性率）分别为46%〜90%和73%〜96%。如果在测定AMY的同时测定脂肪酶（Lipase）或膜腺AMY同工酶则可提高诊断效率，以利于确立正确的诊断。Figure1Afteracutepancreatitisoccurs,amylaseandlipaseactivitieschanges.巨淀粉酶（Macroaauylase）是AMY与多种免疫球蛋白（imnuunoglobulins）之间的复合物。巨淀粉酶分