血清α-淀粉酶活性的测定迈克

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1、血清α-淀粉酶（AMS或AMY）活性的测定Reagentforα-AmylaseTest一、原理二、测定方法三、参考值四、临床意义五、注意事项六、方法学评价一、原理：样品中α-淀粉酶（1，4-α-D-葡萄糖水解酶，又称淀粉内切酶，对1，4-糖苷键连接的葡萄糖有特异性。）催化淀粉分子及糖原中的α-1，4葡萄糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1，6糖苷键支链的糊精，在淀粉（已知浓度）充分的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其颜色的深浅与未经酶促反应的空白管比较，从而推算出淀粉酶的活力。注：1、生物界存在α和β

2、两种淀粉酶，但人体内仅有α-淀粉酶。2、淀粉酶分子量40000~50000,很易由肾排出。二、测定步骤：各管混匀，660nm波长，以蒸馏水调零，测定各管吸光度值。试剂测定（U）空白（B）样品（ml）0.02—蒸馏水（ml）—0.02试剂R1（ml）1.001.00各管混匀，置37度水浴7.5分钟。试剂R2（ml）1.001.00蒸馏水（ml）5.005.002、计算：注：淀粉浓度0.4g/L样品AMY活力（苏氏单位）=样品AMY活力（苏氏单位)=注解①0.4——淀粉浓度②5.0——1单位定义消耗淀粉mg数③15——1单位定义反应时间

3、④7.5——酶的实际作用时间⑤100——1单位定义用血清⑥0.02——样品取量3、AMY活性单位定义：100ml血清中的淀粉酶在37℃，15分钟水解5mg淀粉为1个单位。4、半自动生化仪的使用①测定法：终点法②温度：37℃③波长：623nm④吸量：1000μl⑤参考范围：60~180U⑥线性范围：0~400U三、参考值：血清：60~180U苏氏单位尿液：100~1200U苏氏单位四、临床意义：淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，肺、肝、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶。血清淀粉酶测定主要用于急性胰腺炎的诊断。一般于发病后6~12h开始升高，1

4、2~24h达峰值，2~5d恢复正常，因此血清淀粉酶活性显著升高对急性胰腺炎的早期诊断价值较大。淀粉酶可通过肾小球滤过，尿淀粉酶于发病后12~24h开始升高，持续时间长，下降比血清淀粉酶慢，故胰腺炎后期测尿淀粉酶更有价值。慢性胰腺炎、胰腺癌、急性阑尾炎、溃疡性穿孔、肠梗阻、流行性腮腺炎、唾液腺化脓等血清淀粉酶均可升高。肾功能障碍时，血清淀粉酶升高，尿淀粉酶降低。各种肝病患者，血、尿淀粉酶同时降低。五、注意事项：1、样品为不溶血的血清、血浆或尿液（pH值应调至7.0）样品应在低温条件下运输保存，血清或血浆中淀粉酶2~8℃可稳定30天，室

5、温可稳定7天。2、如果样品中AMY活力大于400苏氏单位或测定管吸光度小于空白管吸光度一半时，应将样品稀释后再进行测定，测定结果乘以稀释倍数。3、加入显色剂及蒸馏水后，应立即比色，否则可致结果偏高。使用血浆时应选用肝素抗凝。4、如遇黄疸、溶血或乳糜标本时应作样品空白。六、方法学评价1.淀粉遇碘呈蓝色反应属有机化学的经典型反应，方法可靠，反应特异性高。2.线性范围：0~400苏式单位（U/L）3.精密度：批内CN≤10%4.准确度：不准确度≤20%5.空白吸光度：空白管在660nm波长处，10mm光径，吸光度≥0.45