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时间:2019-02-27
《体外抗真菌药敏实验的进展与展望》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、螃螄节莀袅聿膈荿薅袂肄莈蚇肈莃莇蝿袀艿蒆袂肆膅蒆薁衿肁蒅蚄肄羇蒄袆袇莆蒃薆膂节蒂蚈羅膈蒁螀膁肄蒁袃羄莂薀薂螆芈蕿蚅羂膄薈螇螅肀薇薇羀肆薆虿袃莅薅螁肈芁薅袃袁膇薄薃肇肃蚃蚅衿莁蚂螈肅芇蚁袀袈膃蚀蚀肃腿芇螂羆肅芆袄膂莄芅薄羄芀芄蚆膀膆芃蝿羃肂莂袁螅莀莂薁羁莆莁螃螄节莀袅聿膈荿薅袂肄莈蚇肈莃莇蝿袀艿蒆袂肆膅蒆薁衿肁蒅蚄肄羇蒄袆袇莆蒃薆膂节蒂蚈羅膈蒁螀膁肄蒁袃羄莂薀薂螆芈蕿蚅羂膄薈螇螅肀薇薇羀肆薆虿袃莅薅螁肈芁薅袃袁膇薄薃肇肃蚃蚅衿莁蚂螈肅芇蚁袀袈膃蚀蚀肃腿芇螂羆肅芆袄膂莄芅薄羄芀芄蚆膀膆芃蝿羃肂莂袁螅莀莂薁羁莆莁螃螄节莀袅聿膈荿薅袂肄莈蚇肈莃莇蝿袀艿蒆袂肆膅蒆
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3、死亡率在不断升。虽然多种抗真菌药物相继问世,绐真菌病治疗带来了新的转机,但目前关于耐药现象的报道也逐渐增多,因此,无论是对于新抗真菌药物的开发,还是台理地指导临床用药、监控耐药菌株的发生,都迫切需要建立一种准确性高、重复性好的体外抗真菌药敏试验方法。美国国家临床实验标准委员会(NCCIS)于1992年、1995年相继推出了药敏试验方案M27一P、M27一T(全称“酵母菌的液基稀释法抗真菌药物敏感试验方案”),使医学真菌的药敏试验研究取得了明显进展,此方案具有准确性较高、重复性较好的特点,被众多实验室广泛使用,同时也发现了其本身的不足,于是,在完善^凹一T
4、的基础上,NCcIs于1997年6月公布了药敏试验的标准方案M27一A】。本文拟就近年来体外抗真菌药敏试验的进展和展望作一综述=1N27一A方案的新内容虽然,N27一P和N27一T方案的应用为体外药敏实验的发展提供了良好的参照,但是,它们本身又存在着许多不足如:药敏方案的应用在检测药物和受试菌种方面尚受一定限制:对ArnH的耐药菌株的监测不足;新生隐球菌在RPMl一1640培养基生长不良;唑类药物终点判读的准确性还需要完善等=根据大量的实验结果,NCCLS推荐的眦一A,从一定程度上丰富了上述内容。1.1抗真菌药物的种类及范围测试药物包括:氟康唑(F皿)、
5、5一氟胞嘧嚏(5一咒)、酮康唑(KCZ)、伊曲康唑(XCZ)和二性霉紊B(AmB),药物所取的测试范围应该包括质控和参考菌株的MIC值在内,水溶性药物FCZ为0.125—64,、5一FC为0.125—64~gtml;脂溶性药物KCZ为0.0313—16腭,、ICZ0.0313—16/和AraB00313~16N/ml;方案要求:常用的ar.aJI婀SkinDis.Deel999.Voll5,N04脂溶性药物的溶剂DMSO在最终容积的浓度不能超过1%,因为浓度过高可抑制真菌活性,所,脂溶性药物需采用DNSO溶解,液体培养基稀释。1.2培养基配制更加严格通常
6、情况下,应用RPNI一1640培养基:将RPNI一1640粉末10.4g溶于900ml蒸馏水中,加34.53gMOPS至终浓度为0.165moFL,直至其溶解:搅拌过程中,应用1moFLNaOH调整其pH至70(25℃),定容至1.oL,滤过灭菌,存于4℃备用。特殊情况下,选用特定培养基,(1)监测AraB耐药菌株的实验中,选用抗菌液基3号,即Pem,ssay液基。(2)在隐球菌的药敏实验中,选用酵母氮源培养基(YNB)培养基。(3)在终点判读困难的实验中,培养基中加人2%葡萄糖有助于增加终点判读的准确性。1.3推选优质质控菌株M27一A方案的质控及参考
7、菌株MIC值()分布范围见表1。药敏实验应该质控、参考菌株为判定标准,质控、参考菌株的MIC值应处于药物受试浓度范围的中心;在连续进行的实验中,允许质控、参考菌株的MIC值有二个稀释度差异;质控、参考菌株应该向ATCC或具有菌种保藏能力的机构购买。1.4明确规定抗真菌药物的敏感、耐药数值范围详见表2。上述数值中,FCZ与ICZ的数值取自于粘膜念珠菌感染的临床资料,5一FC取自于药代动力学的研究结果,从某种程度上,对临床治疗有一定指导作用,但是,它的使用有一定局限性.而且敏感、耐药值也不是绝对不变的。对于FCZ,MIC值4或8V#,-1均可能是它的敏感值,
8、而克柔念珠菌、光滑念球菌对FCZ有先天耐药的特性,不适应于上述的FCZ的敏感、耐
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