冬凌草活性成分分离提取及其抗菌活性研究

《冬凌草活性成分分离提取及其抗菌活性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号UDC密级编号硕士学位论文冬凌草活性成分分离提取及其抗菌活性研究ResearchonExtractionandAntimicrobialactivityofActiveComponentsfromRabdosiarubescens学位申请人：贾培培指导教师：汪伦记副教授单击此处填写姓名一级学科：生物学二级学科：微生物学学位类别：理学硕士2016年04月万方数据独创性声明本人声明，所呈交的论文是我个人在导师指导下完成的研究工作及取得的研究成果。据我所知，文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河南

2、科技大学或其它教育机构的其他学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解河南科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校拥有对所有学位论文的复制权、传播权、汇编权及其它使用权（特殊情况需要保密的论文应提前说明，但在解密后应遵守此规定）。需要保密的论文请填写：本学位论文在年月至年月期间需要保密，解密后适用本授权书。（需要保密的学位论文无须向图书馆提供论文的电子文档）研究生签名：导师签名：日期：万方数据摘要摘要冬凌草是我国重要的中草药之一。

3、它不仅具有清热消炎作用，而且还具有良好的抗癌抗菌效果。现今，我国科研工作者对冬凌草治疗癌症的药理学和临床应用进行了深入研究，但对其抗菌活性及机理的研究报道不多，尤其是抑制食源性致病菌的研究尚未见报道。本文通过对河南济源市冬凌草活性成分的分离提取，抑菌活性和抑菌机理以及抗氧化性的研究，为开发天然安全的植物源防腐剂奠定基础。主要研究结果如下：1、以金黄色葡萄球菌为供试菌，采用单因素和响应面实验，对超声辅助乙醇回流提取冬凌草活性成分的工艺进行了优化，获得最佳提取工艺为：超声功率200W，提取温度62℃，提取时间44min，料液比1:25g/mL，乙醇体积分

4、数95%。在此优化条件下，提取的冬凌草粗提物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达到28.89mm。2、采用液液萃取法，利用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇对冬凌草粗提物进行了初步的分离，并对获得各溶剂组分进行了抑菌活性试验，筛选出抑菌活性最强部分氯仿相。对氯仿相萃取物的抑菌谱研究表明：其对金黄色葡萄球菌（S.aureus）、枯草芽孢杆菌（B.subtilis)、铜绿色假单胞菌（P.aeruginosa）、表皮葡萄球菌（S.epidermidis）、多杀性巴氏杆菌（P.multocida）、嗜水气单胞菌（A.hydrophila）、副溶血弧菌（V.Paraha

5、emolyticus）、哈氏弧菌（V.harveyi）和鼠伤寒沙门氏菌（S.typhimurium）具有一定的抑制作用，对大肠杆菌（E.coli）、福氏志贺氏菌（S.flexneri）、白假丝酵母菌（C.Albicans）、黑曲霉（A.niger）和青霉（Penicillium）没有抑制作用。其中，金黄色葡萄球菌（S.aureus）、枯草芽孢杆菌（B.subtilis）、表皮葡萄球菌（S.epidermidis）和副溶血弧菌（V.Parahaemolyticus）的抑菌圈直径达到20mm以上，达到抑菌敏感标准。3、冬凌草对受试菌金黄色葡萄球菌（S.a

6、ureus）、枯草芽孢杆菌（B.subtilis）、副溶血弧菌（V.Parahaemolyticus）和表皮葡萄球菌（S.epidermidis）最低抑菌浓度分别为125µg/mL、62.5µg/mL、250µg/mL和125µg/mL，最小杀菌浓度分别为250µg/mL、250µg/mL、2000µg/mL和500µg/mL。4、以金黄色葡萄球菌为供试菌，采用扫描电镜和透射电镜对冬凌草的抑菌机理进行了研究。试验结果表明：扫描电镜下观察到正常金黄色葡萄球菌菌体细胞呈典型的圆形或卵圆形，葡萄状排列，而冬凌草抑菌活性物质作用4.5h小时后，菌体中间出现凹

7、陷，有一明显缢缩痕，呈典型的元宝状；透射电镜下观察到正常金黄色葡萄球菌菌体细胞呈典型的圆形或卵圆形，葡萄状排列，细胞壁、细胞膜I万方数据摘要光滑，完整，细胞质均匀，而冬凌草抑菌活性物质作用4.5h小时后的金黄色葡萄球菌菌体细胞变形，细胞质固缩，细胞质与细胞壁出现分离，有的细胞壁部分缺损，有内容物外泄，部分菌体内出现空腔。5、提取的冬凌草活性成分具有较强的还原性和抗氧化活性，具有一定的清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的活性。冬凌草醇提物质量浓度为800µg/mL时的总还原力相当于160µg/mLVC的总还原力，质量浓度为720µg/mL

8、时的总抗氧化活性则相当于160µg/mLVC的总抗氧化活性；在冬凌草醇提物质量浓度达到320µg/mL时，对