球毛壳nd35在宿主植物上的侵染定殖及其菌肥研制初探

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1、山东农业大学硕士学位论文球毛壳ND35在宿主植物上的侵染定殖及其菌肥研制初探姓名：米士伟申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：高克祥20120612山东农业人学硕l：学位论义中文摘要球毛壳(Chaetomiumglobosum)ND35是一株优势内生真菌。本论文以杨树组培苗和黄瓜幼根为试材，研究了球毛壳ND35子囊孢子萌发后在宿主植物上的侵染定殖方式和途径。研制了以球毛壳ND35子囊孢子为主要成分的微生物肥料，通过温室试验和大田试验，初步研究了微生物肥料对作物生长的影响。在离体条件下，以毛白杨组培苗和黄瓜幼根为宿主植物，借助

2、光学显微镜、扫描电镜，结合免疫荧光标记技术，研究了球毛壳ND35子囊孢子萌发后在毛白杨根、茎、叶和黄瓜幼根上的侵染行为及其菌丝在杨树组培苗根部的定殖。结果显示，子囊孢子萌发后形成的菌丝，能从宿主根、茎部表皮细胞问隙侵入，也可以形成附着胞或菌丝足，进而形成侵染钉直接从表皮细胞侵入；在叶部主要从气孔侵入叶片内部。侵入根部的菌丝主要定殖于表皮细胞，极少侵入根毛内部，但未发现进入内皮层和维管束组织。利用台盼蓝、异硫氰酸荧光素(FITC)、Cy3荧光素染色法检测自然条件下黄瓜根上球毛壳ND35的侵染定殖情况。结果显示，球毛壳ND35能在黄瓜

3、毛细根表面附着、定殖，菌丝经由菌丝足侵入黄瓜根内部，或从表皮细胞间隙侵入。侵入根内的菌丝主要定殖在皮层。球毛壳ND35在49C下保藏30个月后，子囊孢子萌发率依然保持在85％以上，说明球毛壳ND35可以长期存放，这为延长以子囊孢子为主要成分的微生物肥料的货架期提供可能。用麦粒培养球毛壳ND35能获得的孢子产量是2．8x106个／ml，大于其它几种菌糠培养料的产孢量，但差异性不显著。而且麦粒成本高，可以考虑利用菌糠进行培养，降低成本，实现废弃物再利用。四种菌糠制备的球毛壳ND35肥料均对黄瓜的根长、株高、根鲜重、地上鲜重有促进作用，

4、且棉籽壳和木耳菌糠制备的肥料处理效果最好，两种肥料所含孢子含量最大，可以考虑利用棉籽壳和木耳菌糠作为载体进行培养。还对蛭石作为填料的可行性进行研究，结果表明蛭石可以作为填料，以增加菌肥的稳定性。根据作物的生长规律，可以多次施用微生物肥料使促生效果更明显。在烟草的育苗和移栽时分别施用球毛壳ND35微生物肥料，通过对苗高和叶片数的分析得出，育苗时施用对苗高的影响较大，移栽时施用影响叶片数目。球毛壳ND35n：宿主植物，卜的侵染定殖及其菌肥研制初探为了验证以球毛壳ND35子囊孢子为主要成分的微生物肥料的稳定性及对作物产量的影响，将球毛壳

5、ND35菌肥应用于大田作物。大田黄瓜施用球毛壳ND35肥料后，能够提前开花结果，而且抗旱性得到提高，产量均高于对照组，特别是两次施用处理，单株产量提高118．30％。同时也提高黄瓜植株的根鲜重和地上鲜重。对甘薯产量促进作用最明显，单株产量提高4倍，另外蔓粗、单株薯数、单株茎叶重分别提高30．08％、93．30％、102．92％。微生物肥料对～年生的板栗、核桃苗的高生长促进作用明显，分别提高35．94％、83．05％，对地径的促进作用不明显；板栗的地上千重、根干重分别提高161．54％、52．08％，核桃的地上干重增加100．1％、

6、根干重增加4％。关键词：内生真菌：球毛壳ND35；侵染定殖；微生物肥料；促生作用¨Abstract锄gfD朋f”，，2gfD6Ds“朋ND35isadominantendophyticfungus·ChinesewhltePOplarDl锄tlets舶mtissuecultureandcucumberradicleweretakenasexperimentalmatenalto：；tudyt11emode觚dapproachofinfectionandcolonizationofC．gIobosumND35觞∞sp供鹤出rgerm

7、inationonhostplants．EffectofmicrobialfertilizerwithCgtD6Ds“聊ND35aScosporesformaincomponentsoncropsWasinvestigatedthroughgreenhouseandfieldexperiments．．In．I，itro．Chinesewhitepoplarplantletsandcucumberradiclewerehostplants·lnfectlonofC咖60s“棚ND35ascosporesaidergerminatio

8、nonpoplarroots，stems，leaVesandcuc啪berradicleanditScoIonizationofhyphaewereinvestigatedbymeansoflightmicroscopy，scanningelect