中药提取物的活性筛选和一测多评技术在中药中的应用

中药提取物的活性筛选和一测多评技术在中药中的应用

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1、中国中医科学院硕士学位论文中药提取物的活性筛选和“一测多评”技术在中药中的应用姓名:张锴镔申请学位级别:硕士专业:中药学指导教师:王智民;张君增;冯伟红201205中药提取物的活性筛选和搿一测多评’’技术在中药中的应用一、中药提取物的活性筛选中文摘要本研究选取卫生部2002年2月28日下发的《既是食品又是药品的物品名单》及《可用于保健食品的物品名单》中的21种中药,分别用水/醇提取制备了22个提取物进行5个方面的活性筛选,以期寻找到具有抗老年性痴呆、降糖及降脂作用的中药。实验中采用酶活性测定法,测定乙酰胆碱酯酶、A

2、.beta积聚、hIAPP积聚、0【.葡萄糖苷酶及脂肪酶等抑制效力的方法,分别以毒扁豆碱、姜黄素、阿卡波糖、奥利司他为阳性对照。实验结果显示,淫羊藿提取物下显示出较强的乙酰胆碱酯酶抑制作用,其抑制率为41.34%(毒扁豆碱抑制率为100%);淫羊藿、香附、天麻、红景天及金樱子药材提取物显示出了较强A.beta积聚抑制作用,其活性抑制率分别为52.63%、62.58%、50.70%、46.86%、48.36%(姜黄素抑制率为66.78%);绞股蓝提取物显示出一定的hlAPP积聚的抑制活性,抑制率为47.41%(姜黄素

3、抑制率为70.82%);蒲黄、菟丝子、山药、香附、红景天及刺五加提取物显示出一定的洳葡萄糖苷酶抑制活性,其抑制率分别为27.57%、31.34%、28.17%、26.72%、26.98%、29.40%(阿卡波糖抑制率为69.76%);香附、红景天提取物还显示出一定的脂肪酶抑制活性,抑制率分别为40.74%和60.63%(奥利司他抑制率为95.45%)。本实验为进一步发现中药中新的乙酰胆碱酯酶抑制剂、A.beta积聚抑制剂、hlAPP积聚抑制剂、Q一葡萄糖苷酶抑制剂及脂肪酶抑制剂积累了数据,并为开发具有抗老年性痴呆、

4、降糖及降脂等作用的保健品及药品提供了参考。二、“一测多评"技术在中药中的应用中药多成分、多功效的作用特点使得单指标的质量控制难以全面反映中药的内在质量,多成分同步质量控制势在必行。在实际工作中,多成分同步质量控制需要提供足量的对照品;而中药对照品的难以分离或化学单体不稳定导致对照品的供应量不足,使得单一成分的质量控制尚存在一定的难度,多指标的质量控制更是受到限制。“-N多评"技术的提出为解决这类问题提供了一个新的思路。目前“-N多评’’技术已在黄连、丹参、吴茱萸等20多味常用中药材的应用中得到验证,其中黄连的“-N

5、多评”方法已被2010年版《中国药典》收录。中国中医科学院二零零九级硕士研究生学位论文1、“一测多评’’技术在淫羊藿及复方制剂中的应用首先,以淫羊藿药材中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C及宝藿苷.I为指标,建立淫羊藿药材中上述5个黄酮类成分的HPLC同步测定方法。采用C18色谱柱,以乙腈一0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL·miffl,检测波长270nm,柱温35℃。在此条件下,5种成分的分离度良好。在以下线性范围内O.000784"--'0.392¨g,o.000844"-'0.422}

6、lg,o.000804"--'0.402pg,O.000784"-0.392¨g,O.000820"--'0.410Jag,线性关系良好,相关系数均大于0.9999。其加样回收率为98.69%~101.7%,RSD为1.8%~2.5%,表明该方法的准确度良好。其次,建立了朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C及宝藿苷.I与内参物淫羊藿苷间的相对校正因子和采用相对保留值对待测成分进行定位的方法,分别为:.届¥‰革藿苷=o.73,f2朝70ri蕾m定B,薹莩=o.80,270定rimc,瑶羊藿苷=o.81,/;誓0督rim.u淫

7、羊着苷=1.37和厂朝藿定A/淫革藿苷=o.69,,.朝藿定B,淫单藿苷=o.78,厂胡蕾定c/淫荤藿苷=o.90,,.宝雹昔.I,淫革藿昔=1.71。同时对相对校正因子的耐用性做了考察,重点考察了不同仪器、不同色谱柱、流速、柱温、修饰剂等因素的微小变化对相对校正因子的影响。结果表明,在对色谱条件进行微调的情况下,相对校正因子的重现性和耐用性良好(RSD<5%)。最后,分别采用外标法和“一测多评"法测定19批淫羊藿药材及20批炙淫羊藿中5种黄酮类成分的含量,采用相对误差法对测定结果进行评价。结果表明,“一测多评"法

8、的测定结果与外标法的测定结果无显著差异,相对误差均<5%。说明在缺乏对照品的情况下,“一测多评"技术可以应用于淫羊藿药材及炙淫羊藿的多指标质量控制。在测定的19批药材和20批炙淫羊藿中,5种黄酮类成分含量的差异较大,即使是同一产地的药材,其含量也有较大差异。19批药材中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷及宝藿苷.I的平均含量分别为0.91±0.30,1.

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