板蓝根清热解毒有效部位提取纯化及质量标准研究

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1、提，要对板蓝根清热解毒有效部位进行筛选，并对筛选后的有效部位群进行提取纯化研究，最后建立相应的有效部位的质量标准，为下一步进行各部位发挥清热解毒作用最佳配比研究和相应药理作用对比实验研究打下基础。用不同截留分子量超滤膜将板蓝根总提取物分为不同截留分子量段，采用二甲苯致小鼠耳肿胀初步筛选，再将有效分子量段用大孔吸附树脂、阴阳离子交换树脂分离得到不同部位进一步采用二甲苯致小鼠耳肿胀、小鼠腹腔毛细血管通透性实验评价活性，最后通过特殊颜色反应确定有效部位化学性质进一步结合相关文献研究确定板蓝根清热解毒有效部位群为：总生物碱、氨基酸、总有机酸和多糖。进一步采用紫外分光光度法建立总生物碱、氨基酸和多糖的

2、的含量测定方法，总有机酸的含量测定方法参考文献。采用先醇渗漉后水回流提取的两步提取法在单因素考察结合正交试验设计研究的基础上得到板蓝根最佳提取工艺。在此基础上进行纯化工艺研究，系统研究了反复冻融-酶解法耦合膜分离技术纯化多糖的工艺，阳离子交换树脂分离纯化得到总生物碱和总氨基酸的工艺，阴离子交换树脂结合有机溶剂萃取纯化总有机酸的工艺。最终得到各个有效部位的纯度分别为：总生物碱大于60%，总氨基酸大于80%，总有机酸大于70%,多糖大于60%。以相应对照品采用薄层色谱定性、紫外分光光度法定量、高效液相色谱法定量以及高效液相色谱指纹图谱建立板蓝根有效部位群的质量标准，保证了有效组分质量的均一与稳定

3、，并为后续研究及成方制剂生产质量的稳定性提供一定基础。关键词板蓝根；清热解毒；总生物碱；总氨基酸；总有机酸；多糖；质量标准ResearchonExtraction，purificationandqualitystandardsofactiveprinciplesofRadixIsatidisinheat—cIearinganddetoxicatingSpeciality:PharmacyAuthor:ChenKaiTutor:ProfessorTianJing-zhenAbstractBoltingtheactiveprinciplesofRadixIsatidisinheat-cleari

4、nganddetoxicating,andthenstudyingtheextractingandpurificatingartworkofactiveprinciples,finanalyerectingthequalitystandards.Basingofthesework,itispossibilytoresearchthebestmarchingproportionofactiveprinciples.UsingmembraneseparationtoseparateRadixIsatidisintodifferentsections,theiranti-inflammatorye

5、ffectswereevaluatedbymicemodelstreatedbyaceticacid-inducedceliaccapillarypermeabilityandxylene一inducedmouseears.UsingmacroporousresinandionexchangeresinfurtherseparateRadixIsatidisintodifferentsections,andalsoevaluatedbythetwomicemodels,finally,deteminingtheirchemicalpropertybycolorreactions.Erecti

6、ngassayingwayoftotalalkaloids,totalaminoacid，totalorganicacidandpolysaccharide.Onthebaseofmon-factorinvestigationandorthogonalexperiment，theRadixIsatidiswasextractedbypercolatingandthenbackstreaming.ThepolysaccharideofRadixIsatidiswaspurificatedbymeanoffreezethawing-enzymolysis一membraneseparationmu

7、lti-technique.Researchingthecationexchangeresinpurificationartworkoftotalalkaloidsandtotalaminoacid.Researchingthepurificationartworkoftotalorganicacidbymeanofanionexchangeresincouplingorganicsolventabstrac