vasa、卵泡抑素(fst)和抗缪勒氏管激素(amh)在半滑舌鳎繁殖周期中的作用研究

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1、Yj一产，LL-I．--4．：■“。：E；砷一-11：。o：lr独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果．也不包含未获得f篷；室旦控亘基丝壹墨蹙型主盟鲍．查拦卫窒2或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：氅最盏丧签字日期：伊f埠6月f日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用

2、学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘．允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名张运素导师签字彦i劳谚髻签字日期：伽I揖6月l13签字日期：年月13学位论文作者毕业后去向工作单位：通讯地址：电话邮编‘蜘，卵泡抑#(FST)和抗缰韩＆管檄紊(AMH)在}*i鳎繁殖周期中的作用目究Vasa、卵泡抑素(FST)和抗缪勒氏管激素(AMH)在半滑舌

3、鳎繁殖周期中的作用研究．摘要半滑舌鳎(CynoglossussemilaevisGfinther)是我国近海的大型名贵经济鱼类。本研究利用分子生物学和mRNA原位杂交技术，分析了Vasa、卵泡抑素(follistafin，FST)、抗缨勒氏管激素(anti．mullerianhormone，AMH)在半滑舌鳎繁殖周期中的功能．所得结果与结论如下：1半滑舌鳎Va,sa基因的克隆和表达本研究克隆了半滑舌鳎Vasa基因的cDNA序列，其全长2602bp，编码包含722个氨基酸残基的蛋白质．有一个经选择性剪切形成的亚型。推导的氪

4、基酸序列古有DEAD—box家族特有的8个保守，N末端含有5个RGG重复和lo个RG重复。组织表达分析表明，Vosa基因在性腺中表达量丰富，性腺外组织仅在心脏中有微量表达。利用RT-PCR和mRNA原位杂交技术研究了csVasa在性成熟半滑舌鳎繁殖周期的表达模式。在卵巢中，Vasa的表达量在初级卵黄期和囊泡期要显著高于核周期和退化吸收期；精巢中，Vasa在精于细胞增殖期的表达量要明显高于精母细胞增殖期和精子成熟期。这些结果表明，Vasa可能在半滑舌鳎的配子发生中起重要作用。初级卵黄期卵巢的VasamRNA原位杂交结果显示

5、，VasamRNA在Ⅲ期郭母细胞的胞质中均匀分布，外局皮晨信号强度较高。2半滑舌鳎FST基因的克隆和表达采用RACE技术克隆得到了半滑舌鳎FST的eDNA序列，其全长1455bp．编码包含321个氨基酸残基的蛋白质，属于TGFB家族。组织表达分析表明，FST在半滑舌鳎13中组织中均有表达，其中在性腺中表达最高，脑和鳃中表达量较高，证明FST具有广泛的生理作用。利用RT-PCR技术研究了FST在性成熟半滑舌鳎繁殖周期的表达模式。在卵巢中，FST的表达量核周期晟高．初级卵黄期和囊泡期较高．推测FST抑制FSHl伸一目泡抑素(

6、肿)目批缪#＆§湖i(AMH)在}*}《蟹镕月期十∞怍月研究__1+-f．研胞发育的作肌而对LH无明显作用；精巢中，FST在各个时期n何鼻{j、，jF且精子细胞增殖期表达量较低，推测这是因为FST对芳香化酶的i、MH基因的克窿和表达幂州RT-PCR技术克隆得到了半滑舌鳎AMH的cDNA片段序列，长度9b>bp．_⋯蚂318个氢基酸。属于TGFB家族。组织表达分析表明，AMH在仅’{滑舌Ⅻ约悱腺中表达，并且在精巢中的表达量要高于卵巢。列嘲RT-PCR技术研究了AMH在性成熟半滑舌鳎繁殖周期的表达模式。在卵巢中，AMH在初级

7、卵黄期和囊泡期表达量较高，在退化吸收期晟高，推测鱼类的AMH与哺乳类一样具有抑制FSH的作用。研究还发现，在雌性半滑舌鳎繁殖期中，AMH可能具有抑制LHR表达的功能。精巢中，AMH在精母细胞增殖期表达量最高，进入繁殖期后表达量显著下降．与AMH在哺乳动物进入青春期后被睾酮(T)抑制相一致，证明在鱼类中AMH同样被T抑制。此外，AMH具有组织精于发生启动的生理功能。关键词：半滑舌鳎Vasa卯泡抑素、抗缪勒氏管激素繁殖周期弛、卵泡抑襄(FST)自抗譬勒R管澈i(AMH)在}*}鲳繁殖周期cp∞忭用m兜Studiesonfun

8、ctionofVasa、foIlistatinandanti-mullerianhormoneinreproductivecycleof@noglossussemilaevisGiintherAbstractHalf-smoofutonguesole(CynoglossussemilaevisGfinther)isa