丙醇-水中酪蛋白水解物的酶修饰与ace抑制活性研究

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1、引言高F值低聚肽和含低聚糖的活性肽等。这些外源性活性肽对促进人体健康发挥着重要的作用。近年来，随着人们对功能性食品和营养品需求的日益增加，人们对健康饮食的意识也在逐渐提高，在过去的几十年里，对于食源生物活性肽的研究足以说明它对人体发挥着重要的生物活性作用(图1．1)。由于生物活性肽所体现出的生理学作用，它们在食品科学与营养研究领域上引起了广泛的关注，对生物活性肽的研究已成：勾当今食品科技界最热门的研究课题之一。生物活性肽黼收旧小～瓣憎熟卜～增强饱腹感0I勰雷的l蒸对人体的影响胃肠系统ll免疫系统lI神经系统

2、I肌肉骨骼组织II心血管系统图1．1食源性肽类的生物活性及其对人体的影

3、响Fig．1—1Bioactivitiesoffoodprotein-derivedpeptidesandthebodysysteminfluenced．1．2．2生物活性肽的主要作用(1)抗高血压作用对于高血压患者来说，如果抑制了ACE的活性，就能有效的预防和治疗高血压疾病。目前，已从米糠蛋白、牛乳酪蛋白、玉米蛋白、明胶、大豆蛋白、发酵豆制品、小麦蛋白等食源性蛋白质中分离出了多种ACE抑制肽，且证实了它们对高血压具有明显的抑制作用。从酪蛋白中分离出的功能性肽类物质对心血管系统主要起到抗血栓形成和抗高血压的功效。Maruyama和Suzuki[6]报道了胰蛋白酶水解的酪蛋白具有

4、体外ACE抑制活性。从水解后的酪蛋白中分离得到这些肽段，分别是11sl-酪蛋白f(23．：24)、f(23．27)、f(194．199)和B．酪蛋白f(177．183)和f(193。202)[7-9]o由于as2_酪蛋白仅占牛乳体系蛋白质的10％(w／w)，并且它的溶解性和提取率都较低，所以关于从Gts2-酪蛋白：分离ACE抑制肽的研究较少。Maeno等人110J从牛乳的啦．酪蛋白分离得到少量具有较弱ACE抑制活性的肽段，分别为f(189．193)、f(189．197)、f(190．197)和f(198．202)。Karaki等人¨lJ(1990)将胰蛋白酶3东北农业大学工学硕

5、士学位论文!!曼皇曼苎苎!!!!暑曼!詈詈皇皇兰苎!!!曼!!!詈曼詈皇!曼苎!!!曼曼!!!詈暑!曼!!!暑鼍詈!!曼!!!!詈詈曹曼!!!!暑詈詈鲁曼!曼!!寰詈曼!曼曼!!!!曼詈喜詈曼曼!!水解牛乳酪蛋白后的水解产物口服给原发性高血压大鼠，结果发现原发性高血压大鼠的血压显著降低，进而从B．酪蛋白中得到的两种一级结构分别为Val．Pro．Pro和lie—Pro-Pro的ACE抑制肽。由乳制品中获得的ACE抑制肽并没有合成类药物的疗效快，但作为功能性食品，从本质上讲它们具有一定的生物活性，因此它们可以被人们所接受并纳入日常饮食结构中。(2)抗氧化作用自由基是指任何包含一个或

6、多个未成对电子并能独立存在的原子或基团。它作为人体内正常的代谢产物，对维持机体代谢正常运转有特定的促进作用。正常情况下，人体内自由基处于不断产生与清除的动态平衡中，但由于自由基具有性质活泼、可迅速与机体内其他基团和底物重新作用的特点，所以一旦偏离了生理平衡，自由基则可能损伤细胞组织。研究证实：人体内积累过多的自由基会导致癌症、动脉粥样硬化、糖尿病等疾病的发生。人体内存在抑制活性氧(ROS)的抗氧化剂，主要包括酶类抗氧化剂和低分子量的非酶抗氧化剂两种。食品中所含的抗氧化剂并不能完全抵抗自由基对机体的损伤，但可以有效的降低和预防自由基对机体的氧化损伤。许多研究指出：来源于动植物蛋白

7、和多肽中的抗氧化剂对脂类脂或脂肪酸类的过氧化作用、自由基的还原作用具有显著的抑制作用，并且来源广泛，如牛乳il。2

8、、大麦醇溶蛋白[131、大豆【14l等。(3)对神经系统的作用阿片受体主要存在于神经系统和免疫系统中，它可与内源性或外源性配体相互作用。前者称为典型的阿片样肽类，如脑啡肽、内啡肽和强啡肽，它们的N末端结构序列均为Tyr-Gly—Gly．Phe；后者称为非典型的阿片样肽类，这类物质N末端结构的氨基酸序列为不确定序列。然而，内源性和外源性配体的共同结构特点是在N末端位置上都含有一个Tyr残基，从而可与另一个芳香族氨基酸(Xyr或Phe)的残基相结合，这是阿片样肽类的一

9、个重要的结构特征，目的是可与阿片受体的结合位点更好的契合在一起。此外，位于Tyr羟基附近的负电位对于阿片活性是非常必要的，如果缺失了Tyr残基，其生物活性也不存在了[151。1979年，Brantl首次从牛乳酪蛋白中提取出阿片样肽类，即所谓的阻酪啡肽。这些肽类位于B．酪蛋白的60～70氨基酸残基，分别为f(60．63)、f(60．64)、f(60．65)、f(60．66)和f(60．70)，同时它们是具有“型配体特征的肽类物质【16‘181。(4)对免疫系统的作用人体的免疫系统较为复杂，免疫