酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰及其产物ACE抑制活性特征

《酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰及其产物ACE抑制活性特征》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、602011，Vo1．32，No．19食品科孛※基础研究酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰及其产物ACE抑制清眭特征孙辉，赵新淮f乳品科学教育部重点实验室，东北农业大学，黑龙江哈尔滨150030)摘要：采用碱性蛋白酶水解酪蛋白，制备水解度为10．9％、IC5o值为52．6~tg／mL的酪蛋白水解物，并利用响应面法优化碱性蛋A酶催化的类蛋白反应修饰条件。修饰反应时间固定为6h时，适宜的条件为酶添加量3．1kU／gpro、底物质最浓度50g／100mL、反应温度25℃。制备9个修饰程度不同的修饰产物，结果显示：修饰产物ACE抑制活性均提高，并且活性最高的修饰产物的IC5o降低至14．9g／

2、mL。该修饰产物离心分级后，上清液部分和沉淀部分的ACE抑制活性分别低于和高于修饰产物，表明沉淀部分是提高ACE抑制活性的主要原因；Tricine．SDS—PAGE电泳分析表明，修饰产物及沉淀部分有较大分子质量的肽分子生成；该修饰产物和上清液部分、沉淀部分的进一步酶水解处理则显示，酶水解会导致它们的ACE抑制活性降低，但是仍然高于最初的酪蛋白水解物。关键词：酪蛋白水解物；碱性蛋白酶；类蛋白反应；ACE抑制活性ModificationofCaseinHydrolysatebyAlcalase-catalyzedPlasteinReactionandACE-·inhibitoryAc

3、tivityofModifiedProductsSUNHui，ZHA0Xin．huai*(KeyLaboratoryofDairyScience，MinistryofEducation，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China)Abstract：Caseinhydrolysatewithahydrolysisdegreeof10．9％andanACE-inhibitoryICs0of52．6ug／mEWaSpreparedbyhydrolyzingcaseinwithalcalaseandthenmodifiedbyal

4、calase—catalyzedplasteinreaction．Whenthereactiontimewasfixedat6h，theoptimalreactionconditionswereachievedbyresponsesurfacemethodologytobeenzymedosageof3．1kU／gprotein，reactiontemperatureof25℃andsubstrateconcentrationof50g／100mL．Ninemodifiedcaseinhydrolysateswithdifferentmodificationdegreeswere

5、prepared．TheresultsindicatedthateachmodifiedcaseinhydrolysatehadenhancedACE-inhibitoryactivity．TheICsoofthemodifiedhydrolysatewiththehighestactivityWas14．91ag／mL．Thismodifiedhydrolysatewascentrifugedintotwofractions，asupematantandaprecipitationfraction．Thesupematantandprecipitationfractionsre

6、vealedareducedandenhancedACE—inhibitoryactivitywhencomparedwiththeirsuspension，suggestingthattheprecipitationfractionaccountedmainlyfortheimprovedactivityofthemodifiedhydrolysate．Tricine-SDS—PAGEelectrophoresisanalysisalsoshowedthatsoftienewpeptideswithhJghermolecnlarweightsweregeneratedinthe

7、modifiedhydrolysateandtheprecipirationfaction．Thefl~erenzy—mafichydrolysisofthesupematantandprecipirationfractionscouldresultintheimpairmentofACE—inhibitoryactivity．Keywords：caseinhydrolysate；alcalase；plasteinreaction；ACEinhibitoryactivity中图分