林蛙油的综合利用的研究

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1、宁波大学硕士学位论文林蛙油的综合利用研究郑卫星摘要中国林蛙，是我国特有的经济两栖动物，具有很高的食用价值和药用价值。在我国很多地区有分布，但主要分布于我国东北山区。林蛙油是由中国林蛙输卵管经干制而成，是我国传统的中药,具有提高免疫、抗氧化等功效。本文旨在利用林蛙油及蛙卵提取林蛙油多糖和蛙卵油，为大幅提高林蛙产品的附加值，实现其综合利用开辟一条新的途径。60林蛙油经发制，以中性蛋白酶并辅助Co辐照提取林蛙油多糖，以乙醇沉淀法得林蛙油粗多糖，粗多糖经Sevage法和三氯乙酸法去蛋白，对比研究发现Sevage法去蛋白效果优于三氯乙酸

2、法，且蛋白去除率为94.66%，多糖的得率为94.11%。对林蛙油多糖脱色研究发现，D-101型大孔树脂静态吸附法和活性碳吸附法脱色效果不如10%的H2O2效果明显，H2O2脱色率为52.26%。脱色后的林蛙油粗多糖溶液经过DEAE-Cellulose52凝胶进行层析分离，得到3种组分的多糖（分别命名为ORP-Ⅰ、ORP-Ⅱ和ORP-Ⅲ）。林蛙油多糖组分ORP-Ⅲ的GC结构分析结果显示：林蛙油多糖主要含有6种单糖，分别为鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、果糖和半乳糖，其摩尔比为1：8.5：4.8：1.8：6.2：21.7。红外光

3、谱分析发现，多糖同时具有α-和β-端差向异构的碳氢变角振动。多糖的高碘酸氧化发现，氧化后有甲酸生成，说明多糖结构中存在1→6糖苷键。分析核磁共振的碳谱和氢谱可得，多糖中含有糖醛酸和岩藻糖，且异碳头数与单糖种数60一致。通过对比不同剂量Co辐照提取林蛙油的红外图谱发现，在6KGy剂量以下辐照，对林蛙油结构影响不显著，9KGy剂量以上辐照后对林蛙油多糖结构影响较大。林蛙油多糖抗肿瘤药理学实验说明，林蛙油多糖具有抗肿瘤活性。2mg/ml的OPR-5Ⅲ对10/孔SP2/0细胞的抑制率为43.26%，并通过双染试剂盒的染色发现，细胞处于

4、凋亡的状态,证实了林蛙油多糖在诱导肿瘤细胞凋亡的作用。通过小鼠的林蛙油喂养实验，1%的酶解和未酶解饲料喂养小鼠可以显著提高小鼠中的SOD、GR活性，且1%酶解林蛙油饲料可以显著减少小鼠体内MDA、NO水平，对小鼠体内的CAT活性影响不显著。说明林蛙油有抗氧化作用。通过对林蛙和蟾蜍不同部位营养成分分析，比较不同部位营养成分的差异。并采用超临界二氧化碳萃取技术对蛙卵的油脂成分进行萃取，得到卵油的最佳提取工艺是：物料粒度为100目、萃取压力为40MPa、萃取时间为2h，卵油的得率为15.18%。I宁波大学硕士学位论文关键词：林蛙油多

5、糖，纯化，结构分析，抗肿瘤活性，营养分析II宁波大学硕士学位论文ThestudyofcomprehensiveutilizationofOviductusRanaeAbstractRanatemporariachensinensisDavidisakindofamphibian.RanatemporariachensinensisDavidonlyliveinChinaNortheast,andithashigheconomicalvalue.OviductusRanaehasalonghistoryofbeingusedin

6、traditionalmedicineandhavebeenreportedtoimproveimmunityandpreventdiseasessuchasantioxidant,antitumor.ThispaperselectedkindsofactivefractionsOviductusRanaepolysaccharides,oilfromeggsofRanatemporariachensinensisDavidandsoon,andgaveanewpathforimprovingRanatemporariache

7、nsinensisDavidproductsodditionalvalueandrealizingsyntheticallyutilizing.Firstly,OviductusRanaeiswateringinwater,andthenenzymehydrolysiswithneutral60proteaseassistancewithradiationinCoforextractedpolysaccharides,thepolysaccharideswereprecipitatedwithathanol.Crudepoly

8、saccharideswerepuritiedwithtwomethods,comparedwiththetwomethodsofSevageandtrichloroaceticacid,thebestdeproteinatingmethodandconditionwasSe