糙皮侧耳水溶性多糖的分离纯化及结构的研究

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1、摘要糙皮侧耳P拓“阳n姆D5舰口f酣(Jacq．ex．Fr)QueI(简称PO)系担子菌纲口蘑科真菌，近年来学者们侧重于对其化学成分、药理作用、优化培育等方面的研究。弄清其结构，对于深入了解糙皮侧耳的药理活性，更好地利用糙皮侧耳这～广泛又具有多种功能的真菌资源是至关重要的。本文提纯了PO水溶性多糖并研究了其结构，为糙皮侧耳的药理作用和临床应用提供理论依据。PO经热水煮提、醇析，分离出水溶性粗多糖。Gc分析表明粗多糖的单糖组成为葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)、岩藻糖(Fuc)，摩尔比依次为：3．88：2．28：3．28：1．

2、oo，说明PO粗多糖为一种中性杂多糖。PO粗多糖经冻融离心、链蛋白酶酶解、sevag法脱蛋白、乙醇分级、凝胶柱层析方法纯化得水溶性多糖POP。，凝胶柱层析、比旋光度测定、高效液相色谱(HPLc)分析证明POR组分平均分子量为2．4万，酚一硫酸法测定总糖含量为95％，气相色谱(GC)分析其单糖组成为：Glc、MaIl、Gal、Fuc，摩尔比为：17．50：4．42：39．88：1．oo。HPLc、比旋光度测定等方法，检验其均一陛。结果表明POP。分子量及极性均为均一组分。POP3经部分酸水解、高碘酸氧化、smith降解、甲基化、Gc—Ms分析、I

3、R分析、c”．NMR等方法，确定其分子结构为：末端由Glc及Fuc构成，主链由l一6Gal组成，以1—2，6Gal为分支点，1—3，6Man为二级分支点，平均每2个1—6Glc就有1个1—2，6Gal分支点。关键词：糙皮侧耳；多糖；分离纯化；结构研究Abstract，k甜阳f姗os加口f姗(PO)belongstoTricholomataceaeaIldBasidiomycetae．Theseyears，scholarslaypanicularemphasisontheresearchofitscheInicalcompos“ion，ph锄ac

4、ologicalfhnction，highqualitycultureandsoon．ItisextremelyimportallttonndoutthepharmacologicalactivityandstmctureofP彪“mf“sos打它“托sfor“sbetcerutilization．Inmisp印er，thestmcturefbatureofwaters01ublepolysaccharideisolatedf如mthemlitingbodyoff)，已“mf淞D占打P口f淞isreported．Theresultsmaypro

5、Videanacademicbasisfortheph删ac0109icalfhnctiona11dclillic印plicationofP昆z打臼f螂Ds抛口f蛳．111ecmdepolysaccharidewasabtainedbyboilinga11dexactingthe丘uitillgbodyof儿舢f淞。鼬℃Ⅱf“s．Thentllewaters01ublecmdepolysaccharidePOPwaSfractionatedbyemall01．Thegaschromatography(Gc)indicatedthatPOPwaS

6、akindofneu廿al}le把∞poIysaccharide姐dcomposedofglucose，mannose，galactoseandfucose．Themolarratiois3．88：2．28：3．28：l_00．Thecrudepolysaccharidewasfkezed—meltedrepeatedlyandd印rotinizedbyprotenaseaIldSevagemethod．．Fllnhernlore，theclassifyingprecipitation血eⅡ1anolandSepharoseCL一6Bgelch

7、romatographywasusedtoobtainthe胁ctionofPOP3．BymeallsofHPLCaIldspecmcopticalrot砒ionmeasurement，itwasprovedtobehomogeneousonmolecularwe远ht．Itsmolecularwei曲wasabout24，OOO．ThetotlecontentofPOP3is95％．Thegaschromatography(GC)indicatedthatPOP3wascomposedofglucose，mannose，g“actoseand

8、fucose．nlem01arratiois17．50：4．42：39．88：1．00．BymeallsofHPLC，cellulousacetate