GBT5009.89-2003-食品中烟酸的测定.pdf

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1、ICS67.040C53通黔中华人民共和国国家标准GB/T5009.89-2003代替GB/T12395-1990食品中烟酸的测定Determinationofniacininfoods2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部*，中国国家标准化管理委员会‘’.‘GB/T5009.89-2003目U吕本标准对应于AOAC43.167-43.174《食物中烟酸的微生物测定法》(1984年版)。本标准与AOAC43.167^-43.174的一致性程度为非等效。本标准代替GB/T12395-1990(食物中烟酸的测定方法》。本标准与GB/T12395-

2、1990相比主要修改如下:—修改了标准的中文名称，标准中文名称改为《食品中烟酸的测定》;—按GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位:中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所。本标准主要起草人:王光亚、李小林、沈湘、石磊、杨晓莉。原标准于199。年首次发布，本次为第一次修订。GB/T5009.89-2003食品中烟酸的测定范围本标准规定了用微生物方法测定食品中的烟酸含量本标准适用于各类食品中烟酸的测定。本方法检出限为10ng，线性范围为0.05pg-0.3pg.2原

3、理某一种微生物的生长，必需某种维生素，例如L.arabinosusl7-5之生长需要烟酸，培养基中若缺乏这种维生素该细菌便不能生长。在一定条件下，该细菌生长的情况，以及它的代谢物乳酸的浓度是与培养基中该维生素含量成正比的，因此可以用酸度或浑浊度的测定法来测定试样中烟酸的含量3试荆31甲苯。323mol/L盐酸溶液。2.4mol/l.盐酸溶液。:.:0.5mol/L硫酸溶液。于2000mL的烧杯中先注人700m工_水，将28ml，硫酸沿烧杯壁慢慢倒人水中，用水稀释至1000mL,3.50.02mol/I一冰乙酸溶液。3.610mol/L氢氧化钠溶液。溶200g氢氧化钠于水中

4、，稀释至500mL,3.70.1mol/L氢氧化钠溶液。溶4g氢氧化钠于水中，稀释至1000mL,3.825%(体积分数)乙醇溶液。3.9酪蛋白:不含维生素。3.9.1不含维生素酪蛋白的制备。3.9.1.1乙醇处理法:称取100g酪蛋白细粉于烧瓶中，加人300mL95%乙醇，在水浴中加热回流1h,减压抽滤，弃去滤液，再加人乙醇回流，如此反复3次一4次，至滤液呈微黄色或无色，取出在烘箱内700C-80℃干燥即可。3.9.1.2酸洗法:称取250g酪蛋白，置于51容器中，慢慢加人3.6L水以防成块，加人浓盐酸2.77mL，搅拌浸泡3min。用虹吸管除去上层清液。加人3.6L水

5、，再加人浓硫酸2.77ml，如此反复8次后，再加水3.6L，加人55.5m工12mol/L氨水，放置过夜，使酪蛋白溶解成浆状。用布过滤，于滤液中慢慢加人约50mL3mol/L盐酸，调至pH4.5，使酪蛋白全部沉淀，过滤。弃去滤液，用50℃一60℃热水冲洗数次，挤压去水，放人烤箱内于100℃烤干即可。3.10酸解酪蛋白:称取50g不含维生素的酪蛋白于500mL烧杯中，加200mL3mol/L盐酸，于压力蒸汽消毒器内10.3X10"P-压力下水解6h将水解物转移至蒸发皿内，在沸水浴上蒸发至膏状。加200ml水使之溶解后再蒸发至膏状，如此反复3次，以除去盐酸。注意每次蒸发时不可

6、蒸干或使之焦糊用10mol/I氢氧化钠调节pH值至3.5，以嗅酚蓝作外指示剂加20g活性炭，振摇，过滤。如果滤液不呈淡黄色或无色，可用活性炭重复处理。滤液加水稀释至500mL，加少许甲苯于冰箱中保存。3.11生理盐水:取9g氯化钠溶于1000mL的水中每次使用时分别倒入6支~8支10mL试管中，每支约加10ml，塞好棉塞，于压力蒸汽消毒器内6.9X100Pa压力下消毒15min，备用3.12胧氨酸、色氨酸溶液;称取4gL-胧氨酸和1gL一色氨酸溶于800mL水中，加热至700C-800C,641GB/T5009.89-2003逐滴加人2.4mol/L盐酸，不断搅拌，直至完

7、全溶解为止。冷至室温，加水稀释至1000mL。加少许甲苯于冰箱中保存。3.13腺嚷吟、鸟漂吟(生化试剂)、尿嚓吮溶液:称取硫酸腺嗓岭(纯度为98%),盐酸鸟嗓吟生化试剂、尿啼咙各。.1g，加75mL水和2ml，浓盐酸，然后加热使其完全溶解，冷却，若有沉淀产生，加盐酸数滴，再加热。如此反复，直至冷却后无沉淀产生为止，用水稀释至100mL。加少许甲苯于冰箱中保存。3.14D-泛酸钙、对氨基苯甲酸、盐酸毗哆醇溶液:称取D泛酸钙、对氨基苯甲酸、盐酸毗哆醇各10mg于烧杯中，以水溶解并稀释至1000ml，将此液置于棕色试剂瓶中，加少许甲