发酵工程与设备实验试题答案

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1、发酵工程与设备实验1.决定揺瓶溶氧量的因素有哪些？它ff］如何影响摇瓶溶氧量?答：⑴摇瓶的透气性：8层纱布，纱布透气性越好，摇瓶溶氧量越大。⑵摇瓶的转速：转速越大，培养基流动越剧烈，增大与气体接触面积。⑶培养基的粘稠度：粘稠度越大，氧气越难进入，溶氧量越低。（4）菌种的形态、密度：若菌体密度大，则相对不易溶。2.采用磷相蓝法测定发酵液中的植酸酶活性实验中，空白对照中并未发生酶和底物的水解反应，但经过显示后，颜色却呈较深的蓝色，试解释其原因。答：①磷钥蓝受热，易被氧化成蓝色还原物。②植酸钠中含杂质磷太多。③培养基中含有的P没有被利用完全3.红曲米发酵实验中，为何要添加酸水？无菌酸水如何制得

2、？答：是为了洗脱菌种，同时为红曲霉生长创造酸性环境。制备：取一烧杯的蒸馆水，往水中加入乳酸并调PH至4.0•然后取10ml配制好的溶液于干净的试管中，密封包扎后，放入高压灭菌锅灭菌，即可得到无菌酸水。4.产植酸酶黑曲■的分离实验中，为何选用植酸钙而不选用植酸钠？答：钠盐易溶解、钙盐难容，植酸钙被利用后易形成透明圈，从而筛选。5.产植酸爾黑曲■的分离实验中，为什么不将脱車胆酸钠溶液和氯■素眼药水加入到備选培养基中一起灭菌？答：①脱氧胆酸钠高温时会与铁盐反应。②氯■素眼药水，生产过程中已经灭菌，若加入到培养基灭菌，6.请详细说明产植酸88黑曲■的分离实验的实验原理。答：以植酸钙为唯一磷来源的

3、选择培养基，同时以透明圈法，从土壤中分离筛选产植酸酶的黑曲雷1.产植酸酶黑曲■的摇瓶发酵实验中，摇瓶的作用有哪些？答：①气体和营养分布均匀②强化传热，使温度保持恒定，不会岀现局部温度过高③代谢产物分散④避免影响其他菌丝生长⑤防止细胞沉淀&植酸酶酶活力测定实验中，若显色后的反应休系测定吸光度值为2.23,说明什么问题？该如何调整实验方案？答：说明待测物浓度过大，应该稀释。9.植酸酶活力测定时做标线的目的是什么？答：标线是反应吸光度与无机磷浓度之间的关系，待我们测的样品吸光度后即可在标线上读出对应无机磷浓度，从而进行酶活计算。10.筒述灭菌锅的使用方法及步骤。答：①向锅内注入水至三脚架上边缘

4、、进行预热。②放入物品，将直排气管并放入排气槽。③关盖，拧紧对应螺栓，打开开关加热④待压力达到0.05MPa,排冷空气，使压力归零。⑤使温度维持在121~126°C,20~30min,之后，打开排气阀，自然归零，开盖，取出物品存用。11.试述试管棉塞的详细制作步骤。答：①剪方形纱布②取方形棉花③对折棉花④紧卷棉花⑤纱布包紧⑥塞入试管并整理⑦扎线⑧去残角12.试述锥形瓶棉塞的详细制作步骤。答：①取适量棉花②对折③紧卷④取适当大小方形纱布⑤包紧⑥塞入锥形瓶并整理⑦将纱布对角，残角塞入纱布内13.试述发酵瓶棉塞的详细制作步骤。答：取8层纱布（取一张对折三次）塞在瓶口内整理纱布，使纱布与瓶壁接触

5、处无折痕即可9.试述平板菌落接种试管斜面的详细步骤。答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒-点燃酒精灯，再消毒手，在酒精灯附近打开平板和试管塞-用接种环在平板上取一环菌丝接种到斜面上，盖上平板，塞上试管塞10.试述摇瓶种子接种发酵瓶的详细步骤。答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒-点燃酒精灯，再消毒手，在酒精灯附近打开瓶塞T用移液管从种子瓶量取适量菌液接种到发酵瓶中一盖上瓶盖，适宜条件下培养11.试述红曲斜面抱子种接至三角瓶的详细步骤。答：工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒-点燃酒精灯，再消毒手，在酒精灯附近打开无菌水试管塞和斜面试管塞T把无菌水加入斜面中，盖上塞子，震荡T

6、在酒精灯旁打开摇瓶塞和斜面塞-用移液管从斜面上吸取适量翘子液，注入摇瓶中-盖上塞子，适宜条件下培养12.植酸酶BB活力测定实验中，样品管与空白管的加样顺序有何不同？为什么不同？答：空白管：先加入TCA,再加入植酸钠，加入TCA后抑制了酶的活性，使后续反应不能进行。样品管：先加入植酸钠，后加入TcA,植酸钠作为酶作用的底物，反应产生无机P,加入TCA后，反应终止。通过空白管的对照，能够得知酶的活性13.植酸酶活力测定实验中，Vc、植酸钠和TCA的作用各是什么？答：Vc:强还原剂，抗氧化能力强，显色液成分之一。植酸钠：酶作用的底物。TCA:使酶失活，终止反应14.所培养的平板有没有可能得不到

7、菌落？试分析得不到菌落的原因及措施。答：有可能。原因：无菌水没有冷却，植酸钙未混匀，稀释后浓度小，没有目标菌措施：①对样品进行富集②取稀释倍数低的稀释液③人为原因引起的可重新培养平板15.产植酸BB黑曲■的分离实验中，平板中为什么要加入1%脱氧胆酸钠溶液？答：抑制真菌菌落菌丝生长速度，防止连成一片，有利得到单菌落，便于实验现象的观察。9.产植酸爾黑曲■的分离实验中，氯■素注射液或氯■素眼药水为何不需要灭菌，加入有何作用？答：氯■素眼