环状沉淀实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划环状沉淀实验报告　　实验三沉淀反应　　可溶性抗原如血清，毒素、细菌浸出液等和相应抗体相遇，当二者比例适当，并有电解质参与时，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应(precipitation)。参与沉淀反应的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。由于沉淀原多为可溶性物质，单位体积内所含的抗原量较多，与抗体结合的总面积大，为求得抗原与抗体的适当比例，操作时稀释抗原而不是稀释抗体，一般以出现沉淀现象的抗原最高稀释度作为沉淀反应效价。　　沉淀反应是临床上常用的血清学试验之

2、一。它的种类很多，有环状沉淀、琼脂扩散、免疫电泳等。利用可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂内进行扩散，当抗原与抗体相对应，二者比例适合时，就出现白色沉淀物。本试验可在试管内、平皿中以及玻片上的琼脂内进行操作。琼脂扩散试验可分为单向琼脂扩散试验与双向琼脂扩散试验等。　　一、单向琼脂扩散试验　　【原理】目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　是单向免疫扩散(singleim

3、munodiffusion)试验中的一种定量试验。将一定量的抗体混合于琼脂内，倾注于玻璃板上，凝固后，在琼脂层中打孔，再将抗原加入孔中。孔中抗原向四周扩散，在抗原与抗体比例合适处，呈现白色沉淀环。沉淀环的直径大小与抗原的浓度成正比。如事先用不同浓度的标准抗原制成标准曲线，则未知标本中的抗原含量可从标准曲线中求出。本试验主要用于检测血清中IgG、IgM、IgA和补体C3等的含量。　　【材料】　　1．%盐水琼脂(生理盐水配制，琼脂含量%)。　　2．人IgG诊断血清。　　3．待检标本人血清。　　4．全国统一人血清免疫球蛋白参考血清，系冻干正常人混合血清。　　5．载玻片、微

4、量加液器、打孔器(直径3mm)、注射针头、两脚规、直尺、半对数坐标纸等。　　【方法】　　1．将适宜稀释度的诊断血清与预先溶化的%琼脂在56℃水浴中混匀，每　　块载玻片浇注3ml，制成免疫琼脂板。　　2．用打孔器在免疫琼脂板上打孔，孔间距为～，挑出孔内琼脂。　　3．稀释参考血清每支干燥血清中加入蒸馏水，待完全溶解后，用～倍比稀释成1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160等5种浓度。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、

5、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　4．加样用微量加液器取10μl各种不同浓度的参考血清，准确地加到琼脂板的各孔中，每种浓度加2个孔，用以制作标准曲线。测待检血清时，血清用PBS作1∶40稀释，每孔加10μl，每份标本加2个孔。　　5．加样的琼脂板置湿盒内，经37℃24h后取出，测各孔沉淀环直径(图1-1)。　　【结果】　　1．取出琼脂板，即可见清晰的乳白色沉淀环。　　2．标准曲线的绘制以各种浓度标准抗原的沉淀环直径为横坐标，相应孔中IgG含量为纵坐标，在半对数纸上画出标准曲线。根据待检血清沉淀环的直径，查标准曲线，将查得的IgG含量乘以标

6、本的稀释倍数，即为血清中IgG含量(图1-2)。　　图1-1单向琼脂扩散试验示意图　　【注意事项】　　1．制备免疫琼脂板时要掌握好温度。温度过高会破坏抗体活性；温度低于42℃则琼脂很快凝固，不能制板。　　2．应从低浓度到高浓度的顺序加样，以免出现误差。　　3　　．沉淀环的直径以毫米为单位测量。　　沉淀环直径图1-2单向扩散标准曲线示意图　　一、ABO血型的测定目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的

7、业务技能及个人素质的培训计划　　将含有抗原的透明浸出液重叠于含有抗体的免疫血清上，在两液交界处发生环状的白色沉淀物，即称为环状沉淀反应。　　炭疽环状沉淀反应又称为阿斯可里氏反应。具体操作方法如图实9-1所示。　　沉淀原的制备　　1．热浸法取被检材料1～3g，在乳钵内研碎，然后加5～10倍生理盐水混合，用移液管吸至试管内，置于水浴锅中煮沸15～30分钟，用中性石棉过滤，获得的透明滤液，　　可再过滤—次。　　2．冷浸法用以检查怀疑为炭疽病畜的皮革和兽毛等材料，操作前，先将其高压灭菌30分钟，以保证检查者的安全。然后取被检材料1g，浸于5～10倍的％石炭酸生理盐水中，