《遗传实验指导》word版

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1、遗传学实验指导一、实验项目1、减数分裂的观察2、果蝇唾液腺染色体的观察3、花粉母细胞涂抹制片4、分离规律5、等位基因分离的验证6、独立分配规律7、基因的连锁与交换8、有丝分裂9、石蜡切片技术10、染色体数目变异的诱发及鉴定11、显微摄影技术12、植物染色体组型分析13、细胞核内DNA的鉴定14、高等植物核DNA的简易快速提取15、外源DNA的花粉管道导入技术16、大肠杆菌E.coliDH5α感受态细胞的制备和转化二、实验项目实验一减数分裂的观察一、实验目的观察并熟悉减数分裂的全过程，以及各个时期染色体的行为和变化，为学习遗传学基本规律奠定基础。二、实验说明减数分

2、裂是在性母细胞成熟时，配子形成过程中所发生的一种特殊的有丝分裂。在性母细胞形成过程中，先由有性组织（如花药、胚珠）中的某些细胞分化为孢母细胞（2n），以后进一步由这些孢母细胞进行两次连续的分裂，而染色体只分裂一次，结果产生四个染色体数目减半的大（小）孢子（n）。这些孢子进一步发育为雌（雄）配子，通过雌雄配子的受精结合，新个体的染色体又恢复到与亲本相同的数目，从而保证了亲代和子代间染色体数目的恒定性。减数分裂各时期的主要特点如下：第一次分裂前期Ⅰ这一时期较长，变化也较复杂，一般又分为五个时期。1、细线期：这是减数分裂开始时期，染色体细长如线，首尾不分，绕作一团，核

3、仁明显，电子显微镜下观察，数目成双。2、偶线期：由于螺旋化，染色体开始变短、变粗，同源染色体配对，出现联会，呈二价体状态是这一时期的主要特征。3、粗线期：配对后的染色体逐渐缩短变粗，由于各染色体是由已复制的两条染色单体通过着丝粒连接起来，故每一配对的染色体中就含有四条染色单体，又称四合体。4、双线期：四合体继续缩短变粗，同源染色体虽因非姊妹染色单体相互排斥而分开，但由于非姊妹染色单体之间发生交换，而在同源染色体的一定区段出现交叉结。5、终变期：染色体变得更短更粗，交叉结向端部移动（端化），核仁、核膜开始消失，染色体分散在整个核内，此时观察染色体最为清楚，便于计数

4、。中期Ⅰ核仁、核膜消失，染色体排列在赤道板上，成对染色体的着丝粒转向两极，纺锤丝出现。后期Ⅰ同源染色体由纺锤丝牵引着丝粒，向两极移动，由于各染色体的着丝粒尚未分裂，每一极只分到每对同源染色体中的一个，故两个子细胞将只有半数的染色体，从而实现了染色体数目的减半（2n→n）。末期Ⅰ染色体移到两极后，松开变细，形成子核，细胞质分裂，在中央由纺锤丝形成细胞板，形成二分体。第二次分裂前期Ⅱ染色体又开始明显缩短，二分染色体的两个染色单体相互散开，但仍和着丝粒连在一起，没有分开。中期Ⅱ每个二分染色体又整齐地排列在各个分裂细胞的赤道板上。后期Ⅱ每个二分染色体的着丝粒纵裂为二，姊

5、妹染色单体分别移向两极。末期Ⅱ拉向两极的染色单体形成新的细胞核，同时细胞质又分为两部分。这样经过两次分裂，形成四个子细胞，又叫四分体或四分孢子，每个孢子内只含有最初细胞的半数染色体，以后就开始了配子体的发育。三、实验材料用具1、材料玉米（2n=20）、普通小麦（2n=42）、水稻（2n=24）、黑麦（2n=14）、蚕豆（2n=12）花粉母细胞减数分裂各时期的永久制片。2、用具显微镜、二甲苯、擦镜纸等。四、实验方法根据前述减数分裂各时期的特点，在显微镜下，先低倍后高倍寻找花粉母细胞分裂相，仔细观察，并分析确定时期，最后按显微镜下观察的实际情况绘图。五、作业绘出减数

6、分裂各时期的图象。实验二果蝇唾液腺染色体的观察一、实验目的学习解剖果蝇三龄幼虫的唾液腺及唾液腺染色体的制片方法，观察果蝇唾液腺染色体。二、实验原理果蝇的唾液腺位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近（图2-1）。剖取果蝇唾液腺细胞进行制片观察，可见到一个由4对染色体的着丝粒结合形成的染色中心，以及向四周伸展的5条染色体臂（X、2L、2R、3L、3R），其中第4对染色体为粒状，与染色中心密切相联，总称为唾液腺染色体（图2-2）。果蝇唾液腺染色体是一种典型的多线染色体。它是果蝇唾液腺细胞核内有丝分裂所致，即核内染色体中的染色线连续复制而染色体并不分裂，结果使每条染色体中的

7、染色线可多达500～1000条，长度和体积分别比其它细胞的染色体长100～200倍、大1000～2000倍，因此也称巨型染色体。由于每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，因而出现一系列宽窄不同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。不同染色体的横纹数量、形状和排列顺序是恒定的。利用这些特征不仅可以鉴别不同的染色体，还可以结合遗传实验结果进行基因定位。此外，由于其体细胞同源染色体的配对，故易于进行染色体的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。三、实验材料用具药品1、材料果蝇的三龄幼虫活体。2、用具显微镜、双筒解剖镜、培养皿、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸

8、、洒精灯、火柴等。3、药