《遗传学实验》word版

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1、06生物技术遗传学实验实验一　果蝇遗传性状的观察背景知识果蝇是在世界各地常见的昆虫,属于昆虫纲,双翅目,果蝇科,果蝇属（Drosophila）。果蝇属有3000多种，我国发现800多种，遗传学研究中通常用的是黑腹果蝇(D.melanogaster)。作为遗传学研究的材料，果蝇具有非常突出的优点。它形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养方便；世代周期短（约12天即可繁殖一带）；突变性状多；染色体数目少，基因组小；实验处理十分方便，容易重复实验，便于观察和分析。果蝇的遗传学研究广泛而深入，尤其在基因分离、连锁、互换等方面十分突出，为遗传学的发展做出了突出的贡献。目前果

2、蝇仍然是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中常用的模式生物。一、实验目的1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型。2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。二、实验材料野生型和几种常见的突变型黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）。三、仪器设备双筒立体解剖镜，培养瓶（粗平底试管或牛奶瓶）及麻醉瓶（与培养瓶一致的空瓶），白瓷板，毛笔。四、药品试剂乙醚，玉米粉，酵母粉，蔗糖，丙酸。五、实验内容和步骤（一）生活周期的观察果蝇是完全变态昆虫，其完整的生活周期可分为4个明显的时期，即卵、幼虫、蛹和成虫（图1-1）用

3、放大镜从培养瓶外即可观察到这4个时期，也可取出用立体解剖镜仔细观察。果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，低温使生活周期延长，生活力减低，高于30℃使果蝇不育甚至死亡。果蝇培养的最适温度为20~25℃，25℃培养条件下果蝇从受精卵到成虫约10天，其中卵和幼虫期5天，蛹4天。成虫果蝇在25℃时约成活15天。卵：受精卵白色，椭圆型，腹面稍扁平，长约0.5mm，在前端背面伸出一触丝，他能使卵附着在事物上。幼虫：受精卵经24h就可孵化成幼虫，幼虫经2次蜕皮到第3龄期体长可达4~5mm。肉眼观察可见幼虫一端稍尖为头部，上有一黑色沟状口器。蛹：幼虫4天左右即开始化蛹。化蛹

4、前3龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的表面（如培养瓶壁），渐次形成一个菱形的蛹，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将羽化。2406生物技术遗传学实验成虫：刚从蛹壳中羽化出来的果蝇，虫体较肥大，翅还未展开，体表也未完全几丁质化，所以成半透明的乳白色。透过腹部体壁还可以观察到消化道和性腺。约1h后蝇体即变为粗短椭圆型，双翅伸展，体色加深，如野生型果蝇初为浅灰，后变为灰褐色。成虫果蝇自羽化后8h即可交配。雄果蝇的精子可储存于雌果蝇的受精卵，以后逐渐释放到输卵管。雌蝇2天后即开始产卵。最初几天每天可产50~70个，随后逐渐减少。图1-1果蝇的生活周期（二

5、）果蝇的形态特征和常见的突变类型1．果蝇雌雄性别的鉴别2406生物技术遗传学实验雌雄成蝇在一些形态结构上的区别很明显，可以通过放大镜和直接观察进行鉴别。只有雄性果蝇在腹尖下侧具有可识别的生殖器，但太微小，难以直接观察辨认。通常在分别雌雄果蝇时，综合各种形态特征进行观察确定（参见表1-1，图1-2）。表1-1雌雄果蝇的形态特征观察雌果蝇雄果蝇大小大小形态腹部宽厚呈椭圆状，腹端稍尖腹部相对窄小呈柱状，腹部呈钝圆形颜色腹部背面外观呈宽度相近的5条黑色条纹腹背只能看到3条条文，上部2条窄一些，后一条宽且延伸至腹面，呈一明暗黑斑性梳无性梳在第一对足的跗节基部有一黑色鬃

6、毛结构，形式一小梳，即性梳图1-2雄性和雌性成虫果蝇的形态特征2．一些常见的突变性状2406生物技术遗传学实验果蝇的突变性状很多，已知的达几百种，并且随着研究的深入会发现或诱变产生更多的突变性状。果蝇的许多突变都是明显而稳定的，而且大多是形态变异，容易观察。图1-3和表1-2列出若干常见的突变性状及其基因符号等，以供参考。图1-3野生型果蝇及几种翅膀突变体1.野生型；2.短圆翅（dp）;3.叶状翅(D)；4.弯曲翅（c）;5.曲卷翅（cu）6扇贝状翅(sd);7.无翅（ap）；8.残翅（vg）(三)果蝇麻醉方法2406生物技术遗传学实验对果蝇进行麻醉处理,是

7、进行性状观察和杂交的必须步骤。麻醉程度是实验成功与否的关键步骤，麻醉不够，果蝇就会飞掉，麻醉过头又会杀死果蝇。用于麻醉的瓶子可与培养瓶一样，麻醉瓶要配上棉塞和软木塞。倒麻醉瓶的操作步骤如下：1．轻摇或轻拍培养瓶使果蝇落入培养瓶底部。2．右手两指取下培养瓶塞，迅速将麻醉瓶口和麻醉瓶口对接严密。3．左手握紧两瓶接口处，倒转使培养瓶在上。4．紧握两瓶接口，使两瓶稍倾斜，右手轻拍培养瓶将果蝇震落到麻醉瓶中。注意不要将培养瓶中的培养基倒入麻醉瓶。如培养基已变的太稀而易掉落，可采用麻醉瓶在上，而用黑纸或双手遮住培养瓶，使果蝇趋光自动飞如培养瓶中。5．当果蝇进入麻醉瓶后，

8、迅速分开，将两瓶各自盖好。再将两瓶的果蝇拍到瓶底，迅