生物:5.1dna的粗提取与鉴定教案新人教版选修1高二

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1、DNA的粗提取与鉴定教学目标:1、知识与能力目标理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理,初步掌握DNA的粗提取和鉴定方法,理解相关溶液的作用机理,培养学生的分析能力,通过实验使学生能够简述科学探究的基本过程。2、情感态度与价值目标通过探索培养科学的怀疑精神和创新精神;通过实验结果,学生树立生命物质性的观点。教学重点:提取DNA的相关原理和步骤教学难点:提取DNA的相关原理和步骤教学过程:开门见山:讲解本实验的目的是提取DNA和DNA的鉴定,其中提取DNA是本实验的重点和难点。提出问题:“DNA主要存在于什么结构上?”“如何提

2、取DNA?”“选什么材料好?”达成共识:1、造适宜材料:选动物细胞,易打破细胞结构2、破坏细胞膜、核膜结构,得核物质。3、将DNA与蛋白质等物质分开,得DNA4、去掉DNA中杂质,提纯DNA。探究实验原理:屏幕展示表格1NaCl2mo1/LNaC10.14mo1/LNaC10.015mo1/LDNA 蛋白质表格2 DNA蛋白质杂质95%酒精不同浓度的NaC1溶液可溶解或析出DNA。95%酒精可提取DNA。填表1:第-4-页共4页NaCl2mo1/LNaC10.4mo1/LNaC10.015mo1/LDNA最大最小变大蛋白质解聚最大变小填表2

3、:DNA蛋白质杂质95%酒精不溶可溶可溶通过对实验原理的预习,表格的比较,使学生明确了各溶液的用途,保证理解实验。请学生代表简述DNA提取实验步骤投影展示实验设计思路:鸡血细胞液①aDNA释放②bDNA与蛋白质的分离③cDNA析出④dDNA浓缩(提纯)获得鸡血细胞核物质:提核物质→溶解→析出→溶解→析出实验步骤:引导学生讨论、回忆并回答目的①~⑨。①防止血凝。②加速血细胞破裂。③溶解DNA。④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L,促DNA最大限度地析出。⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上。第-4-页共4页⑥使含DNA的黏稠物尽

4、可能多地溶于溶液中。⑦除去含DNA的滤液中的杂质。⑧提取DNA。⑨A:出现蓝色。B:无变化讨论与结论:投影给出如下讨论提纲,供学生讨论。(1)DNA粗提取过程中的关键是哪几步?(2)提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液中的上清液?(3)DNA的直径约为2nm,实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个DNA分子直径的大小?学生分组进行讨论并发表讨论结果。教师对讨论进行全程指导,并与学生一起归纳总结。(1)a.提取鸡血细胞的核物质。应用低渗原理和机械搅拌,可得到最大量的DNA。b.析出DNA黏稠物。加蒸馏水要慢,搅拌要轻。c.沉淀DNA时,必须用

5、冷酒精。(2)提取DNA,去除杂质是关键。由于上清液是血液中的血浆部分,不含DNA,所以要除去(含蛋白质)。(3)实验中出现的丝状物是肉眼可以观察到的,这种丝状物的直径要比DNA分子的直径2nm大许多倍,所以实验中出现的丝状物并不表示一个DNA分子的直径。实验结论:细胞中有DNA,DNA遇二苯胺试剂在沸水浴中变蓝色。教学目标巩固1.实验中步骤1和步骤3都需要加入蒸馏水,两次加入的作用相同吗?为什么?2.实验中NaCl的物质的量浓度为2mol/L和0.14mol/L对DNA有何影响?3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成A.砖红色 B.橘黄色 C

6、.紫色D.蓝色补充知识:1、鉴定DNA的其他方法用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。1.配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。2.将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴一滴EB溶液染色。3.将蜡纸放在紫外灯(260nm)下照射(暗室中),可见橙红色的萤光(DNA的紫外吸收高峰在280nm处)。2、DNA粗提取与鉴定的另一种方法1.材料用具新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)。塑料烧杯,量筒,玻璃棒,尼龙纱布,陶瓷研钵,试管,试管架,试管夹,漏斗,酒精灯,石棉网,三角架,火柴,刀片,天平。第-4-页共4页研磨液,体积

7、分数为95%的酒精溶液,二苯胺试剂,蒸馏水。2.方法步骤A.DNA的粗提取(1)准备材料:将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24小时。(2)取材:称取30g菜花,去梗取花,切碎。(3)研磨:将碎菜花放入研钵中,倒入10mL研磨液,充分研磨10min。(4)过滤:在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1000r/min的旋转频率,离心2~5min;取上清液放入烧杯中)。在4℃冰箱中放置几分钟后,再取上清液。(5)加冷酒精:将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为

8、95%的酒精溶液中,并且玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀3~5min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。B.DNA的鉴

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