医学毕业论文--一种羊腰椎间盘退变模型的建立

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1、一种羊腰椎间盘退变模型的建立【摘要】目的建立一种腰椎间盘缓慢退变的羊动物模型。方法取16只山羊随机分成A、B、C、D共4组（每组4只），前3组分别采用不同直径穿刺针(16G、18G、27G)针刺的方法损伤腰椎间盘左前外侧纤维环，D组仅暴露椎间盘未损伤。分别于术前及术后3、6、12、24周对山羊腰椎间盘行放射学和组织学观察。结果C、D组椎间盘无明显改变；A、B组观察到缓慢、可靠的椎间盘退行性变化。结论本方法可以建立一种较理想的椎间盘缓慢退变的羊动物模型。【关键词】椎间盘退变放射学组织学羊［ABSTRACT］ObjectiveToes

2、tablishanintervertebraldiscdegenerativemodelingoat.MethodsSixteengoatswereevenlydividedintofourgroupsinrandom.IngroupsA,B,andC,punctureneedleswith16G,18G,or27Gwereusedtoinduceinjuriestotheleftanterolateralanulusfibrosusoftheexperimentalanimalsrespectively.IngroupD,the

3、dicswereexposedoperativelybutnotinjured.Radiologicalexaminationandhistologicalstudywereperformedbothbeforeand3,6,12and24weeksaftertheexperiment.ResultsNosignificantchangeswerefoundingroupsCandD.Slowandprogressiveintervertebraldiscdegenerationwas7foundingroupsAandB.Con

4、clusionArelativelyidealgoatslowmovingintervertebraldiscdegenerativemodelcanbemadebythemethodusedinthisstudy.［KEYWORDS］intervertebraldisc；degeneration；radiology；histology；goats腰背痛和腰椎间盘突出症的准确病因目前仍有很大争议，但椎间盘退行性变被一致认为在其发生、发展中发挥重要作用［1］。动物模型可以模拟人类椎间盘退行性变的过程，用于其病因、药理学或生物治疗的

5、研究。本实验经过放射学、组织学观察，旨在获得一种缓慢、可靠的椎间盘退行性变动物模型。1材料和方法1.1实验动物选取健康成年山羊16只（青岛大学医学院附属医院动物实验室提供），雌雄各8只，(10.5±0.5)月龄，平均体质量为（31.3±5.6）kg。随机分为A、B、C、D共4组，每组4只。在标准饲养条件下适应性饲养2周。1.2动物模型建立及观察方法①术前禁饮食36～48h，术前20～30min肌注阿托品0.03～0.05mg/kg。②分别在羊臀部肌注氯胺酮10mg/kg及地西泮10mg。③取山羊前肢内侧浅静脉建立静脉输液通道，氯胺

6、酮1～2mg/kg静脉缓慢推注给药。④行气管插管术。⑤山羊取右侧卧位，头部略低于躯干，以羊最末一节肋骨下缘、髂嵴上缘、腰椎横突下47cm、腰椎横突为边界的矩形区域剃毛备皮、消毒，以腰椎横突下2cm的纵线（肋骨下缘、髂嵴上缘之间长约10cm）为切口位置。20g/L利多卡因5mL局麻后经腹膜后入路暴露腰椎间盘，动作要温柔、仔细，避免损伤椎体周围的韧带和组织，任意选相连的4个椎间盘，穿刺针（特制金属箍控制刺入深度）在其纤维环的左前外侧刺入10mm深达髓核（纤维环平均厚度为7.5mm［2］）并停留5s，在相应椎体的横突用金属线作标记。其余

7、椎间盘未损伤作对照，逐层缝合。术中根据麻醉的深浅可适当追加氯胺酮1～2mg/kg，地西泮0.1～0.3mg/kg。⑥待动物较清醒、活泼后，拔出气管插管并肌注地塞米松5mg。⑦动物术前及术后3d肌注青霉素160万单位，术后室内休养3d。⑧A组用16G针、B组用18G针、C组用27G针穿刺，D组只暴露椎间盘未穿刺。⑨各组动物采用上述的方法全麻后分别于术前1周及术后3、6、12、24周，摄腰椎正、侧位X线片。⑩术后各个时间点影像学检查后，每组各处死1只山羊（静脉内注射过量苯巴比妥钠）,每次处死山羊可收获到12个针刺过的椎间盘，12个未损

8、伤的椎间盘（D组6个，A、B、C组各2个）。共得到针刺与未损伤椎间盘各48个。立即用40g/L甲醛液固定1周，乙二胺四乙酸（EDTA）做脱钙处理，石蜡包埋，切成6μm厚的切片。番红O和苏木精伊红染色后光学显微镜下观察。2结果2.1X线观察7D组术