胶质类芽孢杆菌胞外多糖调节及相关基因的转录分析-微生物学专业毕业论文

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1、密级：论文编号：中国农业科学院胶质类芽孢杆菌胞外多糖调节及相关基因的转录分析RegulationofExtracellularPolysaccharideinPaenibacillusmucilaginosusandTranscriptomeStudyonItsRelatedGenes硕士研究生：王庆峰指导教师：李俊研究员申请学位类烈理学硕士专业领域名称微生物学培养单位：农业资源与农业区划研究所研究生院2015年5月万方数据l吣Y帅2㈣78叭吣7㈣7叭0帆4吣Secrecy：No．ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationRegulati

2、onofExtracellularPolysaccharideinPaenibacillusmucilag"andanTranscriptome1ranscritomeStudyYonOnItsItsRelatedenesM．S．Candidate：WangQingfengSupervisor：Prof．Li：LiJUnDegree：MasterofMicrobiologySpecialty：MicrobialFertilizerEngineeringMay2015万方数据独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的

3、地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：王灰烽时间：洲乡年名月砂日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即；中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：王灰举时间：驯乡年乡月L日导师龋参灸时间：2剧厂年6月3．日

4、万方数据中国农业科学院专业学位论文答辩委员会名单表论文题目胶质类芽孢杆菌胞外多糖调节及相关基因的转录分析论文作者王庆峰指导教师李俊学位类别理学硕士专业领域微生物学答辩委员职称单位专业签名陈三凤教授中国农业大学生物学院生物固氮黼李少杰研究员中国科学院微生物所微生物分子遗鸯夕I传沈世华研究员中国科学院植物所融植物分子生物学张俊伶教授中国农业大学资环学院根际微生物7州f朱昌雄研究员中国农科院农业环境与可持微生物生态俐勿续研究所l区划所互作形k砒张瑞福教授中国农科院农业资源与农业微生物与植物沈德龙研究员中国农科院农业资源与农业农业微生物z别彬区划所I、，记录人闳品J论文答辩时间地点加逡．j．习上午?

5、：内注：第一位答辩委员为答辩委员会主席万方数据摘要胶质类芽孢杆菌(Paenibacillusmucilaginosus)因其具有多功能、强抗逆等特点而成为微生物肥料的首选菌种。但该菌在生长过程中产生肥厚的胞外多糖，消耗大量营养，并形成菌胶团，限制了菌体繁殖空间，降低了发酵密度，制约其生产应用。本研究在前期研究的基础上，以实验室筛选获得的优良菌株Pmucilaginous3016为研究对象，进行产生胞外多糖影响因素研究，确定多糖形成的主控因子，借助响应面分析法(RSM)优化初级种子培养基，延缓该菌胞外多糖产生时间，减少胞外多糖产生量，提高其菌体密度与后续发酵效率；进一步在设置产多糖量显著差异的

6、2种典型诱导条件下，利用RNA．Seq技术进行该菌株的转录表达谱分析。研究结果对揭示胶质类芽孢杆菌生成多糖的机制和调控途径、提高菌含量和发酵效率具有一定理论价值和现实意义。本研究取得了如下3方面的结果：1．优化了胶质类芽孢杆菌初级种子培养基，减少了胞外多糖的产生，提高了菌生长密度。通过单因子试验确定了适合菌体生长的碳源和氮源分别为麦芽糖和胰蛋白胨；利用PB(Plackea--Burman)设计评价了9个试验因素对胶质类芽孢杆菌3016产胞外多糖影响的显著性，确定麦芽糖和MgS04"7H20对胶质类芽孢杆菌的影响达到显著水平；利用响应面分析法确定降低胞外多糖产生量、增加菌体发酵密度的最优培养条

7、件，即：麦芽糖2．59／L，胰蛋白胨1．09／L，MgS04"7H200．739／L，K2HP04"3H200．49／L，NaCl0．06g／L，FeCl30．6mg／L，水杨酸lOmg／L，CaC031．09／L。使用该优化培养基，可将菌体多糖含量降低至0．0302medmL，初级种子液有效菌含量达到4．12x108cfu／ml，较优化前提高了近10倍。2．分析了Pmucilaginous3016在多糖产生