一株芽孢杆菌胞外多糖的抗氧化性研究

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1、研究报告中国酿造2010年第8期总第221期·75·一株芽孢杆菌胞外多糖的抗氧化性研究许冰l_(1．淮海工学院海洋学院，江苏连云港222005；2．江南大学食品学院，江苏无锡214122)摘要：在连云港潮问带筛选到～株芽孢杆菌。经液体发酵后分离纯化得其胞外多糖(EPS)。用分光光度法研究了该菌胞外多糖在不同体系中对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子的清除作用。结果表明，该菌胞外多糖能够有效地清除这3种自由基。所以该菌胞外多糖是一种很好的天然抗氧化剂。关键词：芽孢杆菌；自由基：抗氧化性中图分类号：

2、TS202．3文献标识码：A文章编号：0254—5071(201O)08—0075—02AntioxidantefectofextracellularpolysaccharidefromaBacillussp．XUBing0(HaiyangCollege,HuaihaiInstituteofTechnology,Lianyungang222005,China；2．CollegeofFoodScience,JiangnanUniversity,Wuxi214122,china)Abstract：AB

3、acillusstrainwasisolatedfromintertidalzoneofLianyungang．Theextracellularpolysaccharide(EPS)wasobtainedandpurifiedaftersubmergedfermentation．Thescavengi／igefectonDPPHradical，OH。radicalandOi‘radicalbyEPSwereinvestigatedusingspectrophotometry．Theresultsh

4、owedthatEPScaneliminatethethreeradica1．TheEPSproducedbythisBacillusisagoodnaturalantioxidant．Keywords：Bacillus；radical；antioxidaIltefect多糖在自然界高等植物、藻类、细菌及动物体内均存下活化培养18h~2Oh。在，分布极广。通常植物和藻类来源的多糖较为普遍，但1．3．2扩大培养近些年来，微生物来源的多糖越来越引起人们的广泛注使用上海保兴生物工程公司生产的5L自动通气

5、搅拌意[1]。尤其是细菌和真菌的胞外多糖，因其易于分离纯化发酵罐进行发酵。发酵罐容积5L，2层六平直叶搅拌，三而且产量高等优点在工业生产中颇受人们青睐_2_。细菌胞挡板。装料系数0．6，接种量10％，发酵温度37℃，通气量外多糖除了其对细菌自身的生物学意义，更重要的是由于1．0L／(L·min)，搅拌转速300r／min，发酵24h。其具有安全无毒、理化性质独特、用途广泛、易与菌体分离1．4实验方法及可通过深层发酵实现工业化生产等优良性质而倍受关1．4．1胞外多糖的提取注。与植物多糖相比，其生产周

6、期短，不受季节、地域和病发酵液8000r／min离心10min，去除菌体得上清液。上虫害条件的限制，具有较强的市场竞争力和广阔的发展清液以新华3号滤纸抽滤，除去上层漂浮物。用无水乙醇前景。目前，世界上微生物多糖产量的年增长率超过10％，作为沉析溶剂，把沉析所得的粗多糖真空冷冻干燥。一些新型多糖产量的年增长率超过30％，其中细菌胞外多1．4．2胞外多糖的纯化糖占有很大的份额。将所得的粗多糖溶解后，上D．315型大孔树脂脱色，1材料与方法经真空浓缩，上SephadexG．100柱纯化，硫酸苯酚法和考1

7、．1供试菌株马斯亮蓝法r7】同时监测纯度，收集其主峰部分，使用95％vol芽孢杆菌Bacillus筛选自连云港潮间带。乙醇沉淀，冷冻干燥得到多糖纯品。试剂：二苯．2．苦基肼(DPPH)自由基(2，2-Diphenyl一1．1．4．3多糖抗氧化活性测定picrylhydrazy1)为Sigma公司产品，其他试剂均为国产分清除DPPH·的测定方法『31。吸取不同浓度的多糖溶析纯级。液1．0mL，加A．0．03p~g／mLDPPH溶液4．5mL，摇匀，放置1．2培养基30rain。以甲醇为空白在波长51

8、7rim处测定其吸光度值培养基使用2216E液体培养基。A。同时测定4．5mLDPPH溶液与1．0mL甲醇在波长517nm1-3培养方法处的吸光度值。维生素C也以同等浓度参与对照反应。1．3．1种子培养清除率计算公式：用接种环将该芽孢杆菌斜面菌种接种到液体培养基清除率=(Ao-A。)／Aoxl00％。中，250mL三角瓶的装液量为50mL，于37℃、150r／min条件清除羟自由基(·OH)的测定方法。采用H2OdFe斗体收稿日期：2009—06．22作者简介：许冰(1979一)，