nf审审κb在脂卵巢切除小鼠牙槽骨表达及其对成骨能力的影响

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1、天津医科大学硕士学位论文NF-κB在脂卵巢切除小鼠牙槽骨表达及其对成骨能力的影响姓名：张丰伟申请学位级别：硕士专业：口腔医学；口腔临床医学指导教师：贾智201105天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：为了探寻雌激素缺乏所致的骨质疏松症牙槽骨成骨能力与NF-r,B的活化之间是否存在内在的联系，从而为骨质疏松症患者牙周炎的治疗提供研究基础。本实验通过卵巢切除建立雌激素缺乏小鼠模型，运用组织学方法观察卵巢切除小鼠组织病理学改变，逆转录PCR检测小鼠牙槽骨中成骨相关标记物的表达情况，以及免疫组化法和免疫印迹法检测小鼠牙槽骨中核转录因子r

2、,B(NF．rd3)的活化情况和表达量的不同。方法：1．取20只3月龄雌性C3H的小鼠，随机分为两组：假手术组(A组)和卵巢切除组(B组)。切除双侧卵巢(或假手术)，建立小鼠雌激素缺乏小鼠模型；2．10周后，断颈处死两组小鼠。取小鼠牙槽骨，经过固定、脱钙、包埋、切片和HE染色等步骤，观察小鼠组织学差异；3．处死后，立即取小鼠牙槽骨，剔除软组织后，’提取总RNA，经过逆转录、PCR和电泳等过程，检测OCN和Runx2等成骨相关分子mRNA的表达；4．采用免疫组化方法，观察两组小鼠牙槽骨中NF．心蛋白表达情况；5．应用免疫印迹法，经蛋

3、白提取、转膜、封闭和显影等步骤，定量分析两组小鼠牙槽骨中NF．1出蛋白表达的差异。结果：1．卵巢切除小鼠，骨组织学表现为：骨小梁变细、数目减少、密度降低、结构不完整，骨吸收陷窝样结构增多；2．RT-PCR结果显示：卵巢切除小鼠牙槽骨OCNmRNA相对表达量较假手术组低(0．1668士0．0470和0．5391士0．1293，p

4、n-blot结果显示：卵巢切除小鼠牙槽骨中的NF．r,B蛋白活化形式P65相对表达量较假手术组高(0．5854士0．0430，O．1045士0．0270，p

5、weenosteogenesisabilityofalovelorboneinosteoporosismiceandNF—lcBactivation，whichcouldbedevelopedtoprovidenoveltreatmentstrategiesforperiodontitisofosteoporosispatients，themodelsofosteoporosiswasestablishedinC3Hmicebyovarieaomy．Aimtoinvestigatewhethertherewasosteogenes

6、isdeficiencyinOⅥ【cdmice，OCNandRunx2gencprofilesoftwogroupsweremeasured．AimtoinvestigateNF一1cBactivationandtheroleofNF—KB011boneformation，NF-KBproteinWasobservedbyWestern-blotandIHC．Methods：1．20three-months-oldC3Hfemalemicewererandomlydevidedintotwogroups：theshamoperat

7、iongroup(groupA)andtheo、Ⅸcdgroup(groupB)．1’hemodelsofestrogendeficiencymicewereestablishedbyOVX．2．10weekslater,miceweresacrificedbybrokenneck．ARersectioning，balveolaronetissuefixation,deminerlization,embedingandstainingsteps，thehistologicsignificanceWasobservedundermi

8、croscope．3．Afterexecutingthemice，eliminatingsofttissueofalveolarbone,extractingRNA,rcvel'setranscription，polymerasechainreac