hpv18 e6基因特异性沉默对宫颈癌hela细胞增殖和凋亡的影响

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1、AbstractoBJECTIVEToinvestigatetheproliferativeactivityandapoptosisofHeLacellsafterHPV18E6wasknockeddownbyspecificsyntheticsiRNA．METHoDSThechemicallysyntheticsiRNAtargetingHPVl8E6WastransfectedintoHeLacellsbyLipofectamine2000，thenthemRNAlevelsofHPV18E6andhWA

2、PL(humanwingsapart-like，hWAPL)weretesteAbyRT-PCR．MTT，immunocytochemistry，flowcytometryandtransmissionelectronmicroscopewereusedtodetectproliferation，expressionofp53protein，cellcycle&apoptosisandvariationofultramicrostructure，respectively．RESUI』rSMTTresultss

3、howedthedecreaseofproliferativeactivityinHeLacells；RT-PCRresultssuggestedlowerexpressionofE6andhWAPLrnRNAcomparedwithcontrolgroup，whichislowestat48hafterthetransfeetion，whilehigherlevelofp53proteinexpressionWasdetectedbyimmunocytochemistry；flowcytometryreve

4、aledobviousG1arrestincellcycleandnosignificativeapoptosis；mitochondriaswellingandscKrccapoptosiswereobservedbytransmissionelectronmicroscope．CoNCLUSIoNThechemicallysyntheticsiRNAcouldeffectivelysilencetheexpressionofE6，lowerthelevelofhWAPLtranscriptionandup

5、-regulatetheexpressionofp53protein．FinallyitinducessomechangesofHeLacells，includingdecreaseofproliferativeactivity，G1arrestincellcycle，variationofultramicrostructure．Postgraduatestudent：Guang-JieYin(GynecologyandObstetrics)DirectedbyProf’··-。Yan-KuiWangBing

6、LuoKeywords：RNAinterference；Humanpapillomavirus18：UterineCervicalNeoplasms；HeLacells；Genes，WAPL，human学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属说明学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。文中依法引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论

7、文或成果。本人如违反上述声明，愿意承担由此引发的一切责任和后果。论文作者签名：耐治日期：加，8年瑚阳学位论文知识产权权属声明本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属学校。学校享有以任何方式发表、复制、公开阅览、借阅以及申请专利等权利。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为青岛大学。本学位论文属于：保密口，在年解密后适用于本声明。不保密囤。(请在以上方框内打“4")论文作者签名：甜猿日期：Ⅲ年丁月20日导师签名：寸，辰日期：咯年箩月Ⅺ日(本声明的版

8、权归青岛大学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用)引言引言宫颈癌是全球妇女中最常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌居第二位。回顾性调查显示，每年全世界有新发病例45．9万，其中我国每年有新发病例13．15万，占28．8％，居首位IlJ。目前宫颈癌发病趋于年轻化12]，是严重威胁女性健康和生命的疾病，因此，宫颈癌的早发现、早诊断、早治疗已引起国内外许多学者的关注。人乳头瘤病毒感染是宫颈癌的