实验病料的采集

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1、实验二病料的采集、保存及送检一、目的掌握被检病料的采取、保存、送检的方法。二、材料实验动物(鸡)、瓷盘、剪子、镊子、泗精灯、泗精、接种环、载玻片、火柴棒等。三、侦料的采取1.采収病料的基本原则(1)采集最适病料理想的病料，应是无菌釆取的含病原微牛.物量高的血液、器宫组织或分泌物和排池物。因此耍根据疾病的病性采取合适的病料，如无法佔计是何种疾病时，应根裾临床疲状和病理变化采集病料或全而采取病料。取材时成注意病原微生物感染所致疾病的类型(如呼吸道感染疚病、肾肠道感染疾病、皮肤和粘膜性疚病、败血性疾病等)、病原微生物

2、的侵入部位、病原微生物感染的靶器官等。细菌检验病料应当是采fl未经抗菌药物治疗的患病动物，并且应多做几张涂R。(2)适时采集采集病料的吋间一般在疚病流行旱期、典型病急性期，此吋病原微生物的检出率商；活期由于体内免疫力的产生，病原微生物减少，检测病原微生物比较困难，同时可能出现交义感染，增加判断的W难性。在采集供抗体测定川的血淸吋，可适吋地采粜急性期和恢复期的两份血清样unu,—•般两份血清的间隔时间为14〜21d。内脏病料的采取，须于动物死P立即进行；夏季迟不超过4〜6h，冬天不超过24h,否则时间过长，由肠内

3、侵入其他细菌，致使尸体腐败，奋碍于病原苘的检出。供做切片的样品采取后必须立即投入固定液，否则吋间过长，会使细菌和组织细胞死亡、溶解，影响检验结果。有条件做现场培养时，剖开尸体后应进行接种培养，然后采样，敁后剖检。(3)无菌操作采集病料所用的器械及界器要进行严格的消毒：刀、剪、镊子等金属用具可煮沸消毒30ndn，使用前最好用洒精擦拭，并在火焰上烧一下；器皿(玻制、陶制及珐琅制等)在高压灭菌器或干烤箱内灭菌；软木塞和橡皮寒应高压灭菌；载玻片用2%〜5%碳酸钠煮沸消毒5〜lOmin，煮沸•用清水冲洗干净，拭干保存或浸

4、泡于95%洒精屮以备使用；注射器和针头放于淸洁水屮煮沸30min即可，或•次性注射器。病料采取过税都应该无尙操作，尽量避免杂菌污染。采取一种病料，使用一袞器械，或器械泗精擦拭火焰灭菌后再采取另一种病料；一种病料放入一种容器，不可混放。(4)剖前检查若奋突然死亡或病因不明的尸体，须先采取末梢血液制成涂片，镜检，观察是否有炭疽杆菌存在。若疑似炭疽时，不得进行解剖；如需要剖检并获取病料时，应经上级冇关部门同意，选择介适的场地，做好严格的防范工作，剖后要进行严格的消毒处理。只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。2.病料采

5、集的方法(1)液体材料一般川灭菌棉拭子采取破溃的脓汁、鼻液、阴道分泌物与排池物。未破的脓肿、胸水、腹水在皮肤表而消毒后，用无菌注射器抽取。(2)血液无歯采取血液，供病原培养、抗体检测和血液检查之用。体型较大的单蹄和偶蹄类动物少景血样可以从耳背静脉采血；毛皮动物少景采血可通过耳壳外侧静脉采取；鼠类可以通过M尖、耳背静脉、眼窝内血管采血；兔可从耳背静脉、颈静脉、心脏等处采血;鸟类讨以从肘关节内侧的翅静脉、跖部内静脉或心脏采血。(3)乳汁乳房先用消毒药水洗净(取乳者的手也应事先消毒)，外把乳房附近的毛刷湿，蛣初所挤的

6、3〜4股乳汁弃去，然后再采集10ml左右乳汁于灭歯试管中。苦仅供显微镜直接染色检查，则可于其中加入0.5%的福尔马林液。(1)淋巴结及内脏组织应在尸体解剖后立即采収。将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病变的部位各采取1〜2cm3的小方块，分別置干灭菌容器中，并尽可能采取有病变及病变交界处的部位。(2)胃肠及内界物可将胃肠剪下，两端扎好，送往实验室。或川烧红的器具烧烙表面后穿一小孔，用灭菌棉拭子取其A容物，放入无荫的器皿内或放入装有生理盐水或PBS的试管内。(3)脑、脊髓按病理解剖方法取出脑、脊髓。収一部分放入10%福

7、尔马林溶液的瓶屮，供组织学检查；一部分放入50%比油屮理盐水瓶中，供微生物学检查。或者将头部取下，川槊料U袋包好直接送检。(4)胆汴先用烧红刀片或铁片烧烙肌囊表而，再用火菌细管或注射器刺入肌囊内吸取胆汁，置于灭菌试管中。(5)皮肤i•大小约10x10cm2的皮肤一块，保存于30%U'油缓冲溶液中，或10%饱和盐水熔液中，或10%福尔马林液中。(6)骨头耑要完整的骨头吋，应将附着的肌肉和韧带等全部除去，表面撒上食盐，然后包于浸过5%石炭酸水或0.1%升汞液的纱介或麻咖中，装于木箱P、j送到实验室。(7)流产胎儿及

8、小动物尸体将流产胎儿及小动物尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或汕布屮，装于木箱内送到实验室。二、病料的保存1.常用保存剂的配制(1)30%U'油缓冲溶液纯中性甘油30mlNaCl0.5g碱性磷酸钠l.Og0.02%酚红1.5ml中性蒸流水加至100ml混合分装K7，0.105Mpa高压火菌30niin(2)50%甘汕缓冲盐水溶液NaCl2.5g酸性磷酸钠0.46g碱性磷酸钠10.74g纯中