分子病理技术

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1、分子病理技术概论军事医学科学院放射与辐射医学研究所彭瑞云写在课前的话本节课简要介绍了病理学技术的概念及其发展趋势、分子病理技术的地位，详细描述了病理学发展简史、分子病理学和分子病理技术的概念、技术手段等内容，重点阐述了分子病理学常川技术，如免疫组织化学技术、原位杂交、原位PCR技术、原位末端标记技术等。一、绪论(一)病理技术概念病理技术：进行病理研究或临床诊断必不可少的方法或手段，和其他的一些学科相互交叉和应用。譬如蛋口和基因检测等分子牛物学技术。(二)病理技术发展趋势山于生物高新技术在病理学中的应用，使得病理学目前向两方面发展：

2、一方面山于计算机和图像分析技术的应川，由简单的形态描述向量化的方而发展，由直接观察向远程运输间接观察方面发展，因此产生了定量病理学和远程病理学。另一方面由于原位交叉、原位PCR和原位末端标记等分子病理技术水平的进步，使病理学向分子病理学水平发展。尤其是近些年來纳米技术的诞生，使人们对疾病的认识达到了原子水平。二、病理学发展简史病理学的发展可以追溯到2000年以前，那吋己经有了大体解剖、宏观病理，18世纪中叶，由器官病理学(organpathology)产生，因此这也是病理形态学的开端。191U：纪中叶，由于光学显微镜的问世,使病理

3、学产生了细胞病理学(cellularpathology),至今仍在广泛应用。20世纪以后，尤其是近半个多世纪以来，由于电子显微镜的问世，使病理生理学的研究达到了亚细胞水平o20世纪以來山于生命的带头学科，如分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物化学等方法在病理学中广泛应用，尤其是免疫组化，原位杂交、原位PCR、原位末端标记等技术，因此产牛了免疫病理和分子病理。由丁-近年来原子力显微镜的问世，使病理学的研究达到了原子（纳米）水平。病理学的发展可概括为传统的三水平和分子的三水平：传统的三水平包括整体、组织细胞和亚细胞水平，而分子三水平则

4、由蛋白、RNA和DNA三水平构成。这些分子三水平是建立在各种方法基础之上的，如在蛋白水平有免疫组化、组织芯片；在RNA水平有原位朵交、原位PCR和组织芯片，而在DNA检测水平的方法主耍有原位杂交、原位PCR,比较基因组朵交和荧光染色体原位杂交，以及原位末端标记和组织芯片等技术。原子水平主要是利用原子力显微镜。由于技术的进步，使病理学可以从分子、原子基因水平来揭示疾病的木质，尤其是近30年来，形态定量和图像分析技术的发展，使得病理技术概括为两大方面的发展趋势，一方面是山宏观到微观，山纟II织细胞、亚细胞到分子以及到原子，这些水平的进

5、步均以一些仪器设备和一些方法的革新为前提。第二方而是由定性的观察到定量的观察。病理学的发展可概括为传统的三水平和分子的三水平，下列选项中不属于分子三水平的是OA.蛋白B.组织细胞C.RNAD.DNA正确答案：B解析：病理学的发展可概括为传统的三水平和分子的三水平：传统的三水平包括整体、组织细胞和亚细胞水平，而分子三水平则由蛋白、RNA和DNA三水平构成。三、分子病理学和分子病理技术（一）概念1.分子病理学：所谓分子病理学是从分子水平研究患病机体生命现彖的科学。从分子水平来研究疾病的发牛、发展与转归机制的科学，它也是分子牛物学、细胞

6、牛物学、遗传学、牛物化学和经典病理学相互渗透、相互交叉而产牛的应用学科。分子病理学的形成是分子生物学技术在病理学中应用的具体体现。2.分子病理技术：分子病理技术是在分子（蛋白和皋因）水平研究患病机体的病因、病理改变、发病机制和转归等的于•段和方法；也是在组织细胞原位检测蛋口或基因的方法。同时，它是分子生物学技术与经典病理学技术相结合的具体的体现。3.分子牛物学技术：分子牛物学技术是检测蛋白和基因两方面的主要的方法和技术。4.经典病理技术：经典病理技术是组织细胞固定、制片、染色等方面的技术。5.分子病理技术优点：与分子牛物技术相比分

7、子病理技术的优点主要体现在以下三个方而。（1）蛋白和基因不用提取，直接进行原位检测；（2）蛋H和基因的检测与组织细胞形态相结合；（3）可在进行基因和蛋口检测的同时，进行组织细胞的定位和分布。（二）技术手段1.分子免疫学在病理学乃至整个形态学科的应川产生了免疫组织化学技术。形态学科：解剖学、组织学与胚胎学、细胞生物学、病理学、寄生虫学、传染病学等。2.分子生物学技术和形态学科结合起來产生了一系列的分子病理技术。主要包插免疫原位杂交、荧光原位杂交、比较基因纽杂交以及原位PCR和原位末端标记等。3.生物芯片在形态病理学中的应用产生了组织

8、芯片技术。4.纳米技术的问世使得病理学对疾病的认识达原子水平（原子力显微镜）。（三）疾病的病理机制从研究内容方面阐明疾病的病理机制：2.通过信号转导机制和疾病的关系研究，使得在认识疾病的机制方而深入到细胞的信号转导机制，以求阐明它的发生机制，最终寻