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时间:2018-12-01
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1、动物细胞融合与单克隆抗体教学目标:1、了解并能简述动物细胞培养的过程、条件及应用2、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用教学重点和难点:1.动物细胞培养的过程及条件2.单克隆抗体的制备和应用复习回顾:1、植物体细胞杂交的过程是怎样的?2、动物细胞和植物细胞有何不同?一、动物细胞融合:1、概念:也称,是指或动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成的单核细胞称为。2、过程:不同的两个细胞→细胞细胞杂交学海导航两个多个杂交细胞DNA杂交3、 动物细胞融合原理与植物原生质体融合的基本原理是否相同?诱导方法:、、。思考:为什么灭活病毒能够作为诱导剂
2、?不灭活的是否可以?4、动物细胞融合的意义:克服了杂交的不亲和性。物理法化学法生物法远缘灭活的病毒对细胞没有感染能力。动物细胞融合杂种细胞愈伤组织杂种植株植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B植物体细胞杂交去壁融合组培物理法化学法生物法:灭活的病毒动物细胞A动物细胞B杂种细胞5、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去壁后诱导原生质体融合物理法(离心、振动、电激)化学法(聚乙二醇获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合除以上方法,还有生物法制备单
3、克隆抗体二、单克隆抗体:1.其由何种细胞产生?2.主要分布在哪里?3.如何得到抗体?提问?动物细胞A动物细胞B杂种细胞用动物细胞融合的方法制备单克隆抗体试一试聚乙二醇 或灭活的病毒杂交瘤细胞细胞培养提取抗体效应B细胞肿瘤细胞单克隆抗体制备过程示意图注意:①对小鼠做何处理?②细胞融合后,培养液中共有几种细胞?有几种融合细胞?③杂交瘤细胞的特点:既能大量,又能产生。思考: 产生抗体的杂交瘤细胞如何筛选出来的?注射特定的抗原蛋白五种(B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B-B、骨-骨、杂交瘤细胞)其中三种融合细胞。繁殖专一的抗体提示:抑制骨髓瘤细胞的DNA复制
4、。单克隆抗体的优点和应用单克隆抗体的优点强,高,大。单克隆抗体的应用:①作为诊断试剂:准确识别各种物质的细微差别,并跟的结合,具有、、、的优点。②用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗,可制成“”,也有少量用于治疗其他疾病。特异性灵敏度产量抗原一定抗原发生特异性准确高效简易快速癌症生物导弹1、从母羊甲的体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉核的卵细胞中,融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宫内,出生小羊的大多数性状()A.难以预测B.像甲C.像乙D.像丙2.(2004年,全国)用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错
5、误的是()A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D.筛选杂交资金积累细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体基础训练巩固BB3.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④4.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上
6、不能存活增殖的细胞是()①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞A.②④B.①③⑤C.①②③④D.②③CA创新应用训练5.右图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答: (1)该方案能达到预期效果吗?。原因是。 (2)图中②为过程,常用作为诱导剂。该细胞继承了,因此不仅能分泌,还有本领。(3)该方案的目的是。不能没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞.细胞融合灭活病毒双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖制备单
7、克隆抗体作业:1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较。2、单克隆抗体制备过程。
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