细胞工程课后思考题答案(杨淑慎主编)

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1、第二章1、目前，常用的植物细胞培养基种类有哪些？各有什么特点？1）MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的平衡溶液。2）B5培养基其主要特点是含有较低的铵，这是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。3）White培养基其特点是无机盐数量较低，适于生根培养4）N6培养基其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。5）KM8P培养基其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合培养。2、简要说明MS培养基的基本组成。1）大量元素母液配制MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）

2、、硫酸镁（MgSO4•7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2•2H2O）五种化合物。2）微量元素母液配制MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4•4H2O、ZnSO4•7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4•2H2O、CuSO4•5H2O、CoCl2•6H2O。3）铁盐母液配制MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4•4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2•EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。4）有机母液的配制MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。5）激素母液配制MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素3、配制培养基时

3、，为什么要先配制母液？如何配制母液？1）配制母液不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取，而且还便于低温保藏。2）基本培养基中的大量元素、微量元素、维生素等一般都分别配制成母液。4、常用的灭菌方法有哪些，各有哪些优缺点？1）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）优点：高温高压蒸汽对生物材料有良好的穿透力，能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡，是一种最有效的灭菌方法。缺点：如果是对培养基或液体溶液灭菌，灭菌时间与需要灭菌的培养基或液体溶液的体积密切相关，时间不足达不到灭菌效果，时间过长培养基内的化学物质遭到破坏，影响培养基成分。2）过滤除菌优点：3）干热灭菌缺点：干热灭菌存在能源

4、消耗大、浪费时间、安全性差问题4）紫外线灭菌缺点：由于紫外线穿透物质的能力很弱，所以只适于空气中和物体表面的灭菌，而且要求距照射物质以不超过1.2m为宜。5）熏蒸消毒优点：方法简便，只需要把消毒的空间关闭紧密即可。296）药剂喷雾消毒5、动物细胞培养常用的培养基组成成分有哪几类，在离体培养过程中有哪些作用？1）天然培养基对促进细胞生长繁殖、粘附及中和物质的毒性有一定作用。2）合成培养基血清的加入对培养非常有效，但对培养产物的分离纯化和检测会造成不便。3）无血清培养基细胞外基质能帮助细胞附着和铁壁；低分子营养成分是细胞生长和代谢所需的；激素与生长因子促进细胞生长繁殖；酶的

5、抑制剂，保护细胞不受培养基内残留酶的损伤。6、初代培养时，接种的一般程序是什么？1）在接种前打开超净工作台紫外灯照射20~30min，关闭紫外灯后，打开超净工作台的风机10min以上，开始无菌操作。2）接种人员先洗净，在缓冲室内换好经过消毒的工作服，带上口罩，并换上拖鞋等。3）上超净工作台后，用酒精棉球认真擦拭双手，特别是指甲处，然后擦拭工作台面及四周，装有培养基的培养器皿和盛外植体的烧杯也要用酒精擦拭消毒后，再放进工作台。4）先用酒精棉球擦拭接种工具，然后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌或放在接种器械灭菌器中灭菌，灭菌后放在器械架上使其自然冷却。5）把植物材料放在75%乙醇

6、中浸泡约30s，再用0.1%的升汞中浸泡5~10min，浸泡时刻进行搅动，使植物材料与消毒剂有良好的接触，然后用无菌水冲洗3~5次。6）接种时培养瓶瓶口要在酒精灯火焰附近，并在接种前后灼烧瓶口。7）接种结束后，清理和关闭超净工作台。7、配制培养基时，加入一定量的植物生长调节物质，它们在离体培养过程中有哪些作用？植物激素是植物细胞生长最适宜的调节物质，它能诱导细胞分裂、愈伤组织再分化以及胚状体发育。植物激素主要包括生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类，有时也使用脱落酸、乙烯等物质。8、什么是生物安全实验室？目前，生物安全实验室的种类有哪些，各有什么特点？1）生物安全实验室是指

7、对由动物、植物和微生物等生物体给人类健康和自然环境可能造成不安全的防范，主要是针对病原微生物或具有潜在危害的重组DNA等生物危险的方法而建起的安全实验室。2）BSL-1(P1)对动、植物和环境危害较低、不会引发疾病BSL-2(P2)对动、植物和环境有中等危害或具有潜在危害的致病因子BSL-3(P3)可通过气溶胶使人传感上严重的甚至是致命的致病因子，对动、植物和环境有高度危害；通常有预防治疗措施。BSL-4(P4)对动、植物和环境有高度危险性；通过气溶胶途径传播途径不明，没有预防措施29第三章1.基本概念细胞的全能性：是指细胞具有发育成完整