中药半枝莲对肝癌h22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究

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1、中药半枝莲对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究【摘要】　　目的探讨不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法观察不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结果不同剂量半枝莲与对照组比较，具有显著性差异（P0.05）；半枝莲与顺铂（DDP）合用组与单用DDP组比较，有显著性差异（P0.05）。结论半枝莲能有效地抑制H22肿瘤生长，并能显著加强化疗药DDP的抑瘤效果。【关键词】半枝莲H22抑瘤　　中药半枝莲(HerbaScute

2、llariaeBarbatae)为唇形科(Labiatae)植物半枝莲ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。半枝莲性味辛、苦、寒，归肺、肝、肾经，是中医处方和成药中的常用中药，具有清热解毒、化淤利尿的功效〔1〕。近代药理学研究表明半枝莲抗肿瘤、抗病原、抑菌、解热、保肝等活性。半枝莲作为一种常用的抗肿瘤中药，在临床上应用多年，对肝癌、肺癌、胃癌、直肠癌、鼻咽癌等均有一定的疗效。本实验观察了不同剂量半枝莲提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响，以及生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指

3、数以及用药前后的体重变化等指标，来探讨半枝莲的抗肿瘤作用机制，以期为半枝莲抗肿瘤新药的开发和研制提供依据。　　1材料与仪器　　1.1药材半枝莲HerbaScutellariaeBarbatae购自济南市建联中药店，并由山东中医药大学药学院生药系石俊英教授鉴定为唇形科(Labiatae)植物半枝莲ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。　　1.2动物及瘤株昆明种小鼠，雄性，体重（20±2）g，由山东大学实验动物中心提供。　　H22肝癌小鼠购自山东省医学科学院药物研究所。　　1.3仪器与试剂超净工作

4、台（北京半导体设备厂）；FA2004型电子天平（上海天平仪器厂）；蒸气消毒器（山东新华医疗器械厂）；注射用顺铂（DDP，批号20041113，规格20mg/支）(齐鲁制药有限公司)。　　2方法与结果〔2，3〕　　2.1半枝莲水提取物的制备称取半枝莲200g，加相当于药材量的5～7倍的水浸泡1～2h，煮沸30min，过滤，药渣加3～5倍药材量的水继续煎煮，煮沸30min，过滤，合并滤液，于水浴上浓缩成每毫升相当于原生药材1g的浓度，即得半枝莲水提取物。　　2.2H22肝癌肿瘤细胞悬液的制备取传代后14d的H22肝癌

5、小鼠，脱颈椎处死，固定于鼠板上，依次用碘酊、酒精消毒操作部位皮肤，置于超净工作台中，无菌条件下，剥取肿瘤，选择生长良好无坏死及液化的肿瘤组织，剔除纤维包膜，在无菌表面皿中剪碎，置组织研磨器中，加入少量4℃生理盐水轻轻研磨，制成肿瘤细胞悬液，调整细胞浓度为1×107/ml。　　2.3昆明种小鼠移植H22肉瘤模型的制作取体重20g左右的昆明种小鼠，每鼠0.2ml接种于右前肢腋窝皮下（肿瘤细胞数约为2×106个），24h后称重，随机分成6组，分组情况为：对照组，顺铂组，半枝莲大、中、小3个剂量组，顺铂+半枝莲中剂量组。

6、以上共分两大组，其中一组观察存活期以计算平均生存率,另一组计算瘤体重及其他相关指标。　　2.4给药与记录观察指标各组给药情况如下：对照组：移植肿瘤后，每日灌服0.4ml生理盐水；DDP组：按2.0mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次，共两次；半枝莲小剂量组：每天按10g/kg体重灌服1次，连续10d；半枝莲中剂量组：每天按20g/kg体重灌服1次，连续10d；半枝莲大剂量组：每天按40g/kg体重灌服1次，连续10d；DDP+半枝莲中剂量组：除每天按20g/kg体重灌服半枝莲中剂量1次，连续10d外

7、；按2.0mg/kg体重隔日腹腔注射DDP0.2ml/只/次，共两次。　　给药10d后停止给药，停药次日处死小鼠，称取小鼠体重，解剖瘤体、肝、肺、脾、胸腺，分别称重，出现提早死亡的动物则提前解剖称重纪录。计算抑瘤率、生命延长率、肝/体比、脾/体比、肺/体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标。抑瘤率＝（C－T）/C×100％。　　T为实验组平均瘤重，C为对照组平均瘤重。结果见表1～4。　　表1不同剂量半枝莲对H22荷瘤小鼠抑瘤率的影响（略）　　与荷瘤对照组比较，△△P＜0.01；与DDP组比较，*P＜0

8、.05，**P＜0.01；n=10　　3讨论　　本实验通过建立H22荷瘤小鼠动物模型，观察了抑瘤率、生命延长率、肝/体比、肺/体比、胸腺指数、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标，对半枝莲的体内抗肿瘤药理作用进行了研究，实验结果表明，半枝莲确实具有良好体内抗肿瘤作用，大、中、小剂量组的抑瘤率分别为38.01%，36.26%，31.58%，与对照组比较，具有显著性差异（P0