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1、YAP在乳腺癌中的表达及其临床意义【摘要】 目的:探讨YAP在乳腺癌组织中的表达及与乳腺癌临床病理特征的关系及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌组织、26例癌旁正常乳腺组织YAP的表达情况。结果:60例乳腺癌组织中有20例为阳性,占33.33%,而在26例正常乳腺组织中有25例为阳性,占96.15%。两组比较,差异有统计学意义(χ2=28.7,P0.0001);乳腺癌中YAP的阳性表达与年龄、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移等无明显关系(P>0.05)。结论:YAP的表达与乳腺癌形成相关,有可能是
2、乳腺癌形成早期的一个标志。【关键词】乳腺癌;YAP;免疫组织化学 〔ABSTRACT〕Objective:TostudytheexpressionofYAPanditsclinicalsignificanceinbreastcarcinoma.Methods:TheexpressionofYAPmunohistochemistryin60breastcarcinomatissues,20carcinomaadjacentnormalbreasttissue.Results:ThepositiveexpressionofYAP
3、atissues,25/26(96.15%)ofcarcinomaadjacentnormalbreasttissue.ThepositiveexpressionrateofYAPinbreastcarcinomatissuesaadjacentnormalbreasttissue(χ2=28.7,P0.0001).NosignificantrelationshipsongthepositiveexpressionofYAPandage,histologicalgrade,tumorphnodemetastases,TNMst
4、agesofthecancer(P>0.05).Conclusions:YAPmaybeimplicatedinthetumorigenesisofbreastcarcinomaasanearlysign. 〔KEY临床分期为0~I期9例,Ⅱ期20例,Ⅲ~IV期31例;对照组选癌旁经病理确诊为正常乳腺组织的标本26例,均为女性,年龄18~42岁,平均年龄30岁。 1.2 方法 YAP检测采用SP免疫组织化学方法。YAP兔抗人多克隆抗体购自北京中杉金桥生物公司,免疫组化SP试剂盒均购于北京中杉金桥生物公司。切片常规脱
5、蜡和水化后,PBS漂洗3次,每次3min;于湿盒内用3%过氧化氢溶液(A液)室温孵育10min,滴加5%~10%封闭用正常动物非免疫血清工作液(B液)。滴加一抗工作液,YAP于37℃孵育箱内孵育12h,PBS漂洗3次,每次3min。滴加生物素标记二抗工作液(C液);滴加辣根过氧化物酶标记的链酶卵白素工作液,配制新鲜的DAB显色剂。苏木素复染细胞核,染色时间2min。 1.3结果判断 YAP的结果分析按照说明书的标准进行:采用半定量的方法,光镜下分析,在排除非特异性染色的前提下,以黄色、棕黄色、棕褐色为阳性,计分方法:(1)
6、按切片中细胞显色深浅评分,0分为无着色;1分:细胞染色呈浅黄色;2分:细胞染色呈棕黄褐色。(2)按切片中阳性细胞比例评分,每例随机观察5个视野,每个视野100个细胞,计数500个细胞中染色阳性细胞数:1分:阳性细胞数目≤10%;2分:显色细胞占11%~50%;3分:显色细胞占51%~75%;4分:75%以上的细胞着色。每例细胞染色积分=(1)×(2),按照积分分值可以分为:阴性表达或无表达(-),0~3分;阳性表达(+),4~8分。 1.4统计学处理 所得数据采用SPSS13.0软件进行统计学处理,计数资料以百分率表示,采
7、用χ2检验对各组YAP、P73阳性表达率之间的差异进行统计比较,计算χ2值和P值,相关性分析采用Spearman等级相关性分析,检验水准为α=0.05。 2结果 YAP阳性染色主要定位于细胞核,显示为棕黄色或棕色颗粒沉着(见图1a~d),60例乳腺癌组织中有20例为阳性,占33.33%,而在26例正常乳腺组织中有25例为阳性,占96.15%。两组比较,差异有统计学意义(χ2=28.7,P0.0001)。 乳腺癌中YAP的阳性表达与年龄组织学分级、TNM分级淋巴结转移等无明显关系(P>0.05)。见表1。表1乳腺癌组织中Y
8、AP的表达与临床病理学指标、ER及PR之间的关系(略) 3讨论 本文应用免疫组化法检测YAP蛋白在乳腺癌组织的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征、ER和PR的关系,为揭示乳腺癌生物学特征提供科学依据。 YAP是一种多功能的细胞内连接蛋白和转录共激活因子。于1994年首次